MTX、RU486对输卵管妊娠组织NF-kB、HB-EGF表达的影响

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目的:输卵管妊娠是妇科常见病,严重危害妇女身心健康,甚至危及生命。近年的研究发现多种细胞因子参与妊娠调节,特别是核因子kB(NF-kB)、肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)成为生殖医学研究的热点,NF-kB、HB-EGF表达于子宫内膜,调节其周期变化,并且表达于蜕膜、绒毛,参与妊娠调节;但NF-kB、HB-EGF在输卵管妊娠中的作用国内外尚未见报道。随着阴道B超、β人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)等检测手段增多,敏感性提高,对输卵管妊娠多能早期诊断,应用甲氨喋呤(MTX)、米非司酮(RU486)等药物保守治疗比例上升,对于其作用机制已经有一些研究,但国内外尚未见MTX、RU486对NF-kB、HB-EGF影响的报道。本课题研究人正常、炎症、妊娠输卵管黏膜NF-kB、HB-EGF的表达及MTX、RU486治疗对妊娠输卵管黏膜、绒毛表达NF-kB、HB-EGF的影响,探讨NF-kB、HB-EGF在输卵管生理、病理过程中的作用及MTX、RU486保守治疗输卵管妊娠的机制,为更有效的防治输卵管妊娠提供理论依据。 方法:1标本1.1正常输卵管壶腹部标本16例,其中增生期9例、分泌期7例;炎症输卵管壶腹部标本18例;妊娠输卵管壶腹部标本33例;术后均经病理证实。 1.2保守治疗失败的妊娠输卵管标本43例,其中MTX治疗组21例、RU486治疗组22例;保守治疗时患者:年龄26~38岁(平均32.16±4.26岁),停经35~56d,生命体征平稳,5IU/L<β-hCG≤5000IU/L,附件包块直径≤3cm,部分可见孕囊,但无原始心管搏动,盆腔无出血或仅有少量出血;但治疗一疗程后因急腹症、复查β-hCG值无下降或出现原始心管搏动行手术。选取未用药治疗、直接行手术的输卵管妊娠患者17例做对照组,在年龄、体重、停经时间、血β-hCG值、附件包块直径方面与保守治疗失败组术前情况均具有可比性。 以上患者均行患侧输卵管切除,术中均诊断为输卵管壶腹部妊娠,取其壶腹部,术后病理均证实为输卵管妊娠,近妊娠部位有黏膜存在,并可见绒毛组织。 2利用免疫组织化学法研究NF-kB、HB-EGF在人正常、炎症、妊娠输卵管黏膜表达及应用MTX、RU486治疗输卵管妊娠对输卵管黏膜、绒毛表达NF-kB、HB-EGF的影响。 3采用MoticMed6.0数码医学图像分析系统测试数据,测得的灰度值取倒数,利用SPSS11.0统计软件包对数据做统计学处理。 结果:1人正常、炎症、妊娠输卵管壶腹部黏膜均有NF-kB表达,NF-kB阳性染色定位于上皮细胞的胞浆、胞膜及部分胞核。1.1正常输卵管黏膜表达NF-kB,增生期(82.73±3.12)、分泌期的表达(83.69±2.89)差异无显著性(p>0.05)。 1.2炎症输卵管黏膜表达NF-kB(93.84±3.77)较正常输卵管增强(83.69±2.89),差异有极显著性(p<0.01)。1.3妊娠输卵管黏膜表达NF-kB(106.51±4.10)较分泌期(83.69±2.89)显著增强,差异有极显著性(p<0.01)。2人正常、炎症、妊娠输卵管壶腹部黏膜均有HB-EGF表达,HB-EGF阳性染色定位于上皮细胞的细胞浆、细胞膜。2.1分泌期输卵管黏膜表达HB-EGF(76.18±3.96)显著高于增生期(67.19±4.26),差异具有显著性(p<0.01)。2.2炎症输卵管黏膜表达HB-EGF(85.13±2.67)较正常输卵管(83.69±2.89)增强,差异有显著性((p<0.05)。2.3妊娠输卵管黏膜表达HB-EGF(105.49±3.89)较分泌期增强(76.18±3.96),差异有极显著性(p<0.01)。 3NF-kB表达于绒毛(108.01±2.31),定位于细胞滋养细胞、合体滋养细胞的胞浆、胞膜及部分细胞核,细胞滋养细胞着色较合体滋养细胞深。HB-EGF表达于绒毛(106.76±4.91),定位于合体滋养细胞、细胞滋养细胞的胞浆、胞膜,合体滋养细胞着色较细胞滋养细胞深。 4MTX治疗组:NF-kB在妊娠输卵管黏膜、绒毛的表达分别为(86.81±3.00)、(82.96±3.02),较对照组(106.37±5.06)、(108.01±2.31)明显减弱,差异有极显著性(p<0.01);HB-EGF在妊娠输卵管黏膜、绒毛的表达分别为(104.08±3.88)、(106.40±4.61),较对照组(104.62±4.93)、(106.76±4.91)差异无显著性(p>0.05)。 5RU486治疗组:NF-kB在妊娠输卵管黏膜、绒毛的表达分别为(102.83±3.07)、(103.78±3.22),较对照组减弱,差异有显著性(p<0.05);HB-EGF在妊娠输卵管黏膜、绒毛的表达分别为(86.14±4.55)、(87.14±4.55),较对照组明显减弱,差异有极显著性(p<0.01)。 结论:1NF-kB、HB-EGF表达于人正常输卵管壶腹部黏膜,与输卵管细胞因子分泌、受精、早期胚胎发育有关。 2NF-kB在人炎症输卵管壶腹部黏膜表达增强,调节炎性细胞因子分泌,参与组织损伤;HB-EGF在人炎症输卵管壶腹部黏膜表达增强,具有促进黏膜修复的作用。 3NF-kB在人妊娠输卵管壶腹部黏膜表达增强,参与输卵管妊娠相关细胞因子分泌、滋养细胞的增殖、分化、侵袭及抵抗细胞凋亡的调节。 4HB-EGF在人妊娠输卵管壶腹部黏膜表达增强,增加输卵管妊娠相关细胞因子分泌,调节胚胎与输卵管黏膜黏附,促进滋养细胞的分化、侵袭。 5MTX、RU486治疗输卵管妊娠,分别作用于输卵管壶腹部黏膜、绒毛表达的NF-kB、HB-EGF,二者具有互补作用,所以MTX、RU486联合用药治疗输卵管妊娠效果会更好。
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