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山羊痘活疫苗的生产我厂多年来一直采用的是热消化法制备细胞,羊痘疫苗生产的季节性强,睾丸采集时数量时多时少,不稳定,生产计划性不强,尤其近一两年羊价高,又进一步加大了羊睾丸采集的难度,如何优化生产工艺,利用有限的睾丸组织制备更多的活细胞,最大限度地提高细胞产量,降低生产成本,提高生产效率,降低人员劳动强度,保证产品质量并使得生产计划完成,值得探索。
本研究采用冷热两种消化法对羊睾丸组织进行消化分离,分别进行原代细胞的培养,细胞长成单层后进行接毒,分别收获毒液并进行配苗。对半成品及成品进行TCID50测定。由于冷消化法的作用较温和,对原代细胞的损伤较小,细胞活力较高,并且活细胞数是热消化的两倍,从而降低一半的生产成本,缩短一半的生产周期。将原代细胞进行传代及添加不同细胞液量,同样收获配苗,并检测半成品、成品的毒价。结果表明,运用冷消化法进行羊睾丸原代细胞传代培养,可以减少一半人员外出采集羊睾丸的时间,减少污染的机率,生产成本差异不明显,不同细胞液添加量试验可以降低15%的生产成本,生产周期不变,因此,上述方法可以大力推广,值得同行借鉴。