【摘 要】
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坦布苏病毒（Tembusu Virus,TMUV）作为一种主要侵害水禽的急性,强传染性和高致病性的传染病病原体,自2010年在我国发现以后,近年来逐渐蔓延到全国大部分地区,感染后会出现生产性能的大幅下降及死亡,让水禽养殖业的从业者经受了严重的经济损失。本实验室于2019年在安徽某鹅场无菌采集了疑似感染TMUV的发病鹅的病料,经RT-PCR鉴定确诊为TMUV感染。将病料研磨滤液接种BHK-21细胞4
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坦布苏病毒（Tembusu Virus,TMUV）作为一种主要侵害水禽的急性,强传染性和高致病性的传染病病原体,自2010年在我国发现以后,近年来逐渐蔓延到全国大部分地区,感染后会出现生产性能的大幅下降及死亡,让水禽养殖业的从业者经受了严重的经济损失。本实验室于2019年在安徽某鹅场无菌采集了疑似感染TMUV的发病鹅的病料,经RT-PCR鉴定确诊为TMUV感染。将病料研磨滤液接种BHK-21细胞48h后细胞出现死亡,将病毒液继续传代,期间进行RT-PCR检测,每代病毒液均能检测到TMUV,结果表明分离毒株为TMUV,将其命名为AQ-19株。根据GenBank上已经发表的TMUV基因组序列,设计10对相互重叠的引物扩增TMUV AQ-19株全基因组序列,拼接测序结果并比对。结果表明AQ-19株全基因长10991nt,含有与其他分离株相同的剪切位点。利用TMUV E基因构建遗传进化树,发现AQ-19株在遗传进化分支上与位于2.1.1亚群的泰国TMUV分离株近缘关系较近,这提示目前我国流行的坦布苏病毒毒株的多样性以及复杂性。为探讨TMUV AQ-19株的致病性,将25只5日龄的健康雏鹅随机分为3组,其中以腿部肌肉注射0.5m L(TCID50=10-4/0.1m L)的方式分别接种TMUV AQ-19株、TMUV AH-F10株、未感染病毒的细胞上清。AQ-19株感染组雏鹅临床表现为角弓反张等神经症状,最后死亡;剖检表现为心包积液,肝脏肿大出现淤血,肺脏出血,脑水肿,脑膜出血,脾脏肿大,胰腺肿大。试验表明AQ-19株可以感染雏鹅,对比于AH-F10株感染后症状较轻且死亡率较低可以发现AQ-19株对雏鹅的致病性更强。选取30只健康的3周龄ICR小鼠随机分为6组,颅内注射30μL和腹腔注射300μL的方式各接种AQ-19株、AH-F10株、未感染病毒的细胞上清各5只。AQ-19株颅内攻毒组小鼠在攻毒后表现为眼部有脓性的分泌物、浑身震颤、后肢瘫痪。试验表明AQ-19株可以感染小鼠,相对于AH-F10株感染后症状较轻来说AQ-19株对小鼠的致病性更强。综上,分离得到一株致病性强的鹅源TMUV AQ-19株,为后续的研究提供了基础的生物材料和科学研究基础。完成了AQ-19株病毒对雏鹅及小鼠的致病性的观察,为今后更好的研究TMUV的致病机制以及防治提供基础,对加强对临床病例的发现跟踪及预防控制坦布苏病毒病有着重要意义。
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