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胃癌(gastric cancer)是常见的消化系统恶性肿瘤之一,其源自于胃粘膜上皮细胞,即胃腺癌(Gastric adenocarcinoma)。胃癌在我国的发病率极高,居各类癌症的首位。胃癌可以发生在任何年龄阶段,但其总体趋势是随着年龄的生长发病率而上升。有关研究发现胃癌的发病原因与遗传因素、胃部疾病、饮食习惯等多种因素有关。而近年来发现,胃癌的发生发展与一种非编码的RNA有关,即microRNAs.MicroRNAs(miRNAs)是近年来新发现的一类长度在22nt左右的非编码的调节性的小分子RNA,其可通过与靶基因mRNA的3’UTR结合介导多细胞生物基因表达转录后水平的调控。随着对miRNAs研究的数量不断增多和功能的不断深入,现已证明miRNA在生物体的胚胎形成、生长发育、细胞的增殖、分化、凋亡、脂肪的代谢及人类疾病的发生发展过程中均发挥着重要的调控作用,其表达失调导致其靶基因的上升或下降,而这些靶基因很多与肿瘤的发生密切相关。因此,miRNAs在肿瘤发生发展过程中起到癌基因或抑癌基因的作用。在本研究中我们将PCR扩增的miR-29a/b/c前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29a/b/c慢病毒表达载体。用pMIR-miR-29a/b/c、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共转染包装细胞系293TN,包装产生慢病毒。经检测成功构建了has-miR-29a/b/c重组慢病毒表达载体。我们用构建成功的has-miR-29a/b/c重组慢病毒表达载体感染胃癌细胞系HGC-27, 72h后利用real-time PCR检测miR-29a/b/c在HGC-27内的表达水平并利用Western blot检测了其靶基因MCL-1的表达,发现在HGC-27细胞内miR-29a/b/c是过表达,并且其靶基因MCL-1的表达量明显的受到了抑制。最后我们利用划痕实验和细胞增殖实验分别观察在HGC-27细胞中过表达miR-29a/b/c后细胞迁移能力及增殖能力的变化。结果显示过表达miR-29a/b/c,HGC-27细胞的迁移及增殖能力明显的被抑制(P<0.01)。