【摘 要】
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溶菌酶又称胞壁质酶,是一种作用于微生物细胞壁的水解酶,具有抑菌溶菌、消炎消肿的特性,被广泛应用于食品保鲜、现代医药及生物研究等领域。溶菌酶广泛存在于动、植物及微生
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溶菌酶又称胞壁质酶,是一种作用于微生物细胞壁的水解酶,具有抑菌溶菌、消炎消肿的特性,被广泛应用于食品保鲜、现代医药及生物研究等领域。溶菌酶广泛存在于动、植物及微生物中,以鸡蛋蛋清中含量最高。珍禽蛋蛋清中溶菌酶酶活力远高于普通鸡蛋中溶菌酶酶活力,更适宜作为优质溶菌酶生产来源。本文以珍禽蛋与阳离子交换树脂为原料,建立一条适合工业化生产的珍禽蛋溶菌酶的制备工艺,研究主要分为以下几个方面:1)溶菌酶提取原料及树脂型号的选用:比较了5种品种鸡蛋蛋清中溶菌酶酶活力及5种型号阳离子交换树脂对溶菌酶的吸附效果,最终选用高原乌鸡鸡蛋及D152型弱酸性阳离子交换树脂作为溶菌酶制备的原料。2)高原乌鸡鸡蛋溶菌酶制备工艺的建立:溶菌酶制备工艺以高原乌鸡鸡蛋为原料,采用正交实验确定了离子交换法的最佳条件:蛋清树脂比为4:1,蛋清稀释倍数为2倍,pH 9.0,搅拌吸附时间为3h,洗脱液选用浓度为1mol/L的NaCl溶液。采用截留分子量为5000Da的PES超滤膜进行超滤除盐与浓缩,选用真空冷冻干燥方法进行干燥,建立了完整的高原乌鸡鸡蛋溶菌酶制备工艺,并对工艺进行10倍放大,制备得到溶菌酶收率达到0.44%,纯度达到97%以上,酶活力高于30000U/mg;3)高原乌鸡鸡蛋溶菌酶质量评价:对最佳工艺参数条件下制备所得溶菌酶进行了相关指标检测,制备所得溶菌酶相关指标符合国家标准规定。并考察了不同温度下溶菌酶的稳定性,-20℃保存下,60天后酶活力保存率为97%;60℃高温下保存,60天后溶菌酶酶活力保存率仍高达74%,证明溶菌酶热稳定性良好。
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