论文部分内容阅读
目的:从青天葵提取、分离出的化合物中筛选抗炎有效成分，并探讨其抗炎作用机制。
方法:采用MTT法检测从青天葵中提取的22个单体化合物对小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞毒作用。通过LPS干预RAW264.7细胞建立体外炎症细胞模型，并分为正常对照组、模型组、阳性对照组、各青天葵单体药物组。Griess法检测青天葵化合物对脂多糖刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7释放NO的影响，筛选抗炎有效成分;酶联免疫(ELISA)法检测细胞上清液中PGE2、TNF-α、IL-6的含量;RT-PCR法和western blot法检测细胞中iNOS、COX-2、ERK1/2、p70S6K在RNA和蛋白水平的表达。
结果:①nervilifordin G(2)、nervilifordinⅠ(3)、apigenin8-C-galactosyl-6"-O-β-glucopyranoside(5)、complanatuside(8)这4个化合物能够明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞中NO的含量，与模型组比较具显著差异(P＜0.05或P＜0.01)，并呈剂量依赖性。②与空白组比较，LPS能明显促进RAW264.7细胞PGE2、TNF-α、IL-6的含量，并且上调iNOS、COX-2、ERK1/2、p70S6K在RNA水平及蛋白水平的表达(P＜0.01)。与模型组比较，青天葵药物组能够降低iNOS、ERK1/2、p70S6K的RNA水平和蛋白水平的表达(P＜0.05)，同时降低COX-2蛋白水平的表达，但对COX-2RNA水平的表达没有影响(P＞0.05)。不同剂量的青天葵干预后，RAW264.7细胞PGE2、TNF-α、IL-6的含量明显降低，并呈剂量依赖性，与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05)。
结论:nervilifordin G(2)、nervilifordinⅠ(3)、apigenin8-C-galactosyl-6"-O-β-glucopyranoside(5)、complanatuside(8)为青天葵的抗炎有效成分，其抗炎作用的机制可能与抑制PGE2、TNF-α、IL-6的分泌，并下调iNOS、COX-2、ERK1/2、p70S6K的表达有关。
方法:采用MTT法检测从青天葵中提取的22个单体化合物对小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞毒作用。通过LPS干预RAW264.7细胞建立体外炎症细胞模型，并分为正常对照组、模型组、阳性对照组、各青天葵单体药物组。Griess法检测青天葵化合物对脂多糖刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7释放NO的影响，筛选抗炎有效成分;酶联免疫(ELISA)法检测细胞上清液中PGE2、TNF-α、IL-6的含量;RT-PCR法和western blot法检测细胞中iNOS、COX-2、ERK1/2、p70S6K在RNA和蛋白水平的表达。
结果:①nervilifordin G(2)、nervilifordinⅠ(3)、apigenin8-C-galactosyl-6"-O-β-glucopyranoside(5)、complanatuside(8)这4个化合物能够明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞中NO的含量，与模型组比较具显著差异(P＜0.05或P＜0.01)，并呈剂量依赖性。②与空白组比较，LPS能明显促进RAW264.7细胞PGE2、TNF-α、IL-6的含量，并且上调iNOS、COX-2、ERK1/2、p70S6K在RNA水平及蛋白水平的表达(P＜0.01)。与模型组比较，青天葵药物组能够降低iNOS、ERK1/2、p70S6K的RNA水平和蛋白水平的表达(P＜0.05)，同时降低COX-2蛋白水平的表达，但对COX-2RNA水平的表达没有影响(P＞0.05)。不同剂量的青天葵干预后，RAW264.7细胞PGE2、TNF-α、IL-6的含量明显降低，并呈剂量依赖性，与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05)。
结论:nervilifordin G(2)、nervilifordinⅠ(3)、apigenin8-C-galactosyl-6"-O-β-glucopyranoside(5)、complanatuside(8)为青天葵的抗炎有效成分，其抗炎作用的机制可能与抑制PGE2、TNF-α、IL-6的分泌，并下调iNOS、COX-2、ERK1/2、p70S6K的表达有关。