黄檗种子休眠的内、外源抑制物的初步研究

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黄檗为芸香科黄檗属植物,为我国传统常用中药材关黄柏的唯一来源植物。现在野生黄檗资源受到严重破坏,通过调查研究发现野生黄檗种群存在自我更新障碍,现已成为濒危物种。由于黄檗种子具有深休眠特性,萌发率较低,严重限制了这一传统中药材的扩种生产。因此,探讨影响黄檗种子萌发的原因具有重要意义。本文以黄檗种子和叶片为试验材料,通过对黄檗种子的透水性和透气性研究、不同部位的浸提液生物测定和内外源抑制物质的生物测定、分离及鉴定,探究黄檗种子的休眠特性和黄檗种子萌发困难的原因。研究结果表明:1.黄檗种子吸水性和透气性研究。完整的黄檗种子和夹裂种皮的黄檗种子用水浸泡后,前期吸水率相差较大,100h后的种子均达到吸水饱和状态;而通过测定层积处理时间不同的黄檗种子与未层积的对比分析,发现黄檗种壳透气性较差,能显著地抑制种子的呼吸。经过层积处理后,种皮对呼吸的抑制减弱,有利于种子打破休眠促进萌发。2.以水和甲醇为浸提剂,发现黄檗种子、胚乳和叶片的浸提液都能抑制白菜种子的萌发和幼苗的生长,而水浸提液与甲醇浸提液相比,后者的抑制作用更显著,既证明黄檗的种皮、胚乳和叶片中均含有萌发抑制物质,也证明其中的萌发抑制物质更易溶于甲醇中,也为更好的选择浸提液提供了理论依据。3.利用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、甲醇和水为浸提剂得到黄檗种皮、胚乳和叶片的相应浸提物,发现各有机相对白菜种子的发芽率、根长和苗高的生长均有不同程度的抑制作用。不同部位浸提液抑制程度为叶片>胚乳>种皮。不同有机溶剂浸提物的抑制作用为甲醇浸提物最大,乙醚相次之;石油醚相、乙酸乙酯相和水浸提物的抑制程度较弱。4.采用系统溶剂分离法对黄檗种子内源抑制物质进行提取分离和生物活性测定,通过石油醚、乙醚、乙酸乙酯和甲醇为浸提剂得到黄檗种皮、胚乳和叶片的相应浸提物,并用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对各组分的有机溶剂进行分析,鉴定存在的抑制物质的种类,从种皮、胚乳和叶片的乙醚相中鉴定出的有机化合物大多数为酸类、酯类和醇类物质,对白菜种子的生长具有明显的抑制作用。
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