论文部分内容阅读
目的:
(1)建立可靠的脑内甾体激素的萃取、纯化和检测方法;
(2)观察雌性大鼠不同动情周期血清及海马雌二醇水平的动态变化;
(3)观察致痫后血清及海马雌二醇水平的动态变化,及其与癫痫发作严重程度的关系。
方法:
(1)健康生理大鼠分为五组:雌性大鼠动情前期组、动情期组、动情后期组、动情间期组及雄性大鼠组,各组6只大鼠分别留取血及海马组织标本;
(2)选择动情期雌性大鼠(290±20g)制备杏仁核点燃模型,记录模型点燃的潜伏期、到达重型发作的时间,观察癫痫发作频率及程度,分别留取点燃成功后的第1、2、3、4、5、6、12、24小时的血清及海马标本;
(3)激素水平测定:a.海马组织匀浆;b.应用有机溶剂萃取;c.HPLC分离纯化;d.应用RIA检测雌二醇水平,ELISA检测孕烯醇酮水平。
结果:
(1)生理周期雌性大鼠血清和海马雌二醇水平分别在动情前期和动情期最高,与其它各期相比存在统计学差异(P＜0.05)。雌性大鼠各期血清、海马雌二醇水平与雄性大鼠之间的差异均有统计学意义(P＜0.05)。
(2)雌性大鼠各期海马雌二醇水平(1.3～1.9fmol/mgwetweight)均高于血清雌二醇峰值水平(0.69fmol/mgwetweight),其中动情期海马/血清比值最高(7.3),动情前期海马/血清比值最低(1.9)。
(3)致痫后海马雌二醇水平存在动态变化(1h开始上升,4h达峰值,随后呈下降趋势),其相邻组间差异均有统计学意义,而血清雌二醇水平无相应变化。
(4)KA注入杏仁核后5～10分钟出现痫样发作,3小时达峰,随后呈下降趋势;海马雌二醇水平的动态变化与癫痫发作严重程度呈相关性,其峰值出现在癫痫发作严重度评分峰值后1h;
(5)致痫后海马孕烯醇酮水平无明显变化,其组间差异无统计学意义。
结论:
(1)海马雌二醇水平均高于血清雌二醇水平,提示海马雌二醇主要由局部合成;还可能受血清雌二醇水平的影响;
(2)癫痫发作后海马雌二醇水平的动态变化,与癫痫发作程度相关。结合血清雌二醇水平无明显变化,提示癫痫发作后海马雌二醇水平主要由局部合成。
(3)癫痫发作早期孕烯醇酮水平无明显变化,提示海马局部合成雌二醇可能不需要从头开始,可以直接由睾酮转化而来。