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研究背景：慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis，CAG)是我国的常见病，常由幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，H．pylori)感染引起，严重的CAG可伴有肠上皮化生(Intestinal metaplasia，IM)和不典型增生(Dysplasia，Dys)，属癌前疾病。但CAG常无明显临床症状或仅有轻度消化不良，不易引起患者的重视，有些患者是在出现了严重的合并症如恶性贫血等后才知患有CAG。胃镜和活体组织检查是目前诊断CAG的唯一方法，但却是一种侵入性的有创检查，患者比较痛苦，对老年患者尤其是心功能不全或心律不齐的患者还有一定的危险，费用也较高，操作需要经过严格培训，由技术熟练和经验丰富的医师来完成。胃黏膜分泌的一些特殊因子如胃泌素(Gastrin)、胃蛋白酶原(Pepsinogen，PG)等，在黏膜发生炎症和萎缩时，其血清中的浓度也会发生变化，因此有可能通过血清学检测的方法来诊断CAG。用这种方法对CAG进行初始的筛选，鉴别患者是否患有严重的CAG，可减少胃镜和活体组织检查的需求。也可应用于老年人CAG的普查，使CAG更易被早期诊断。所以有必要建立一种有效简便的血清学方法来诊断慢性萎缩性胃炎这种癌前疾病。 癌前疾病进展至胃癌需经历长期多阶段的过程，利用肿瘤 第四军医大学硕士学位论文标志物检测这一过程可能及早发现胃癌。ING基因家族是近年来发现的一组具有抑制细胞生长和促进细胞凋亡作用的基因，且与P53密切相关，与野生型p53基因以互相协同、互相依赖的方式通过激活pZI的转录来对细胞生长起负反馈调节作用。内源性pZI基因的表达也受INGI的影响，其表达在多种肿瘤都降低，是一个潜在的肿瘤抑制基因。多项研究表明INGI的表达与肿瘤的发生、发展、分化及预后密切相关，有可能成为一个新的胃癌标志物。 目的1.研究慢性萎缩性胃炎患者血清中胃泌素、胃蛋白酶原的变化及其与幽门螺杆菌感染之间的关系，探讨将胃泌素-17(G一17)、胃蛋白酶I(pGI)和胃蛋白酶11(pGll)作为血清学的诊断标志物，用于CAG的诊断。2.研究ING基因在胃癌和CAG的表达及其与MG7一Ag、血清PGI和Pex/PGll、p53、pZI蛋白及Hp刃ori感染之间的关系，探讨INGI在胃癌发生、发展中的作用，及其能否成为一个新的肿瘤标志物和治疗靶点，用于胃癌的早期诊断和基因治疗。 方法1.120例因消化不良于2002年1月至2003年5月在西京医院消化内科内镜诊疗中心行胃镜检查的患者，在胃窦和胃体各取两块组织做病理检查，作为诊断胃勃膜状况的金标准。根据胃勃膜病理结果将患者分为5组:大致正常组，30例;非萎缩性胃炎组，19例;轻度、中度、重度CAG组，分别为23、32、16例。用ELISA法检测血清基础G一17(bG一17)、蛋白刺激后血清G一17(pG一17)、pGI、pGll及H刀lori IgG抗体。G一17的增加量(iG一17)为刺激后G一17与基础G一17之差。以血清iG一17和 PGFPGH分别作为胃窦和胃体的诊断标志物，应用受试者工作 曲线(reeeiving operator eharaeteristies curves，ROC)评估其诊 断价值，确定截断点，并计算其灵敏度和特异度。 2.用免疫组织化学的方法检测INGI基因、MG7一Ag、p53 和pZI在120例消化不良和30例胃癌患者胃豁膜的表达，RT-第四军医大学硕士学位论文PCR检测ING 1 mRNA在胃癌细胞系的表达，蛋白印迹检测INGI蛋白、MG7一Ag、p53和pZI在胃勃膜组织中的表达，ELISA方法检测血清pGI和pGI/pGll及血清H.刃lori的IgG抗体。 结果1.H.Pyl口ri IgG抗体阳性74例，其中CAG患者阳性53例。随着胃窦钻膜由大致正常向非萎缩及萎缩转变，血清bG一17、pG一17和iG一17的浓度也逐渐降低，与胃窦豁膜病变程度呈负相关;随着胃体薪膜由大致正常向非萎缩及萎缩转变，血清PGI浓度和PGI/PGll也逐渐降低，与胃体豁膜病变程度呈负相关。H.Pylori感染可使CAG的bG一17的水平升高。以iG一17诊断胃窦勃膜萎缩的ROC曲线下面积是0.918(95%CI:0.871-0.965)，尤登指数(YD的最大值是0.729，截断点为5.SPg/ml，灵敏度和特异度分别为89%和84%;以PGI/PGH诊断胃体勃膜萎缩的ROC曲线下面积是0.941( 95%Cl:0.899一0.982)，尤登指数(Yl)的最大值是0.737，截断点为7.8，灵敏度和特异度分别为90%和83%。 2.INGI蛋白在胃癌、癌旁组织、萎缩性胃炎及正常胃勃膜组织中的表达分别为43.3%(13/30)、53.3%(16/30)、66.2%(4 7/71)和87.8%(们/49)，在正常胃勃膜的表达最高，在胃癌中表达最低(p<0.01);其表达与MG7一Ag、p21和p53蛋白的表达呈负相关;与血清PGI和PGI/PGH平均水平呈正相关:在HPylorl’感染阳性组和阴性组间差别无显著性。INGI mRNA在永生化正常胃上皮细胞表达最高，随癌细胞分化程度降低而表达减少。组织标本Westem blot检测结果与免疫组化相似。 结论1.血清iG一17和PGI/PGH可做为诊断CAG的敏感标志物，用于CAG的血清学诊断。这种方法具有较高的灵敏度和特异度，适用范围广，可减少内镜和活体组织检查给患者带来的不便和痛苦，也可减少临床医务人6员的工作量，对CAG初始筛选有一定意义。血清的iG一17和PGI/PGH浓度降