【摘 要】
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目的:应用Hedgehog通路抑制剂Cyclopamine,认识在高侵袭性乳腺癌细胞MDA-MB-231是否存在Hedgehog信号通路活化,研究和探讨Hedgehog信号通路对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭转移
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目的:应用Hedgehog通路抑制剂Cyclopamine,认识在高侵袭性乳腺癌细胞MDA-MB-231是否存在Hedgehog信号通路活化,研究和探讨Hedgehog信号通路对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭转移的作用及机制。方法:以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,用Hedgehog通路抑制剂Cyclopamine处理细胞,MTT法检测细胞的增殖抑制作用,求取48小时的中效抑制浓度。50μmol/L的Cyclopamine作用MDA-MB-231细胞48小时,Transwell小室进行Matrigel(人工重组基底膜)侵袭和迁移实验;明胶酶谱法检测细胞分泌MMP-2、MMP-9的变化;Western-blot检测细胞中P-c-Jun、MMP-9和uPA蛋白表达;RT-PCR检测细胞中Gli1、c-jun、MMP-9、uPA mRNA表达的变化。结果:应用Hedgehog通路抑制剂Cyclopamine后,MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用明显(P<0.05),48小时的中效抑制浓度为95.5μmol/L。50μmol/L的Cyclopamine作用细胞48小时后,细胞的侵袭、迁移能力均下降(P<0.05);MMP-9的酶活性降低(P<0.01);P-c-Jun、MMP-9、uPA蛋白表达均减少(P <0.01);Gli1、c-jun、MMP-9、uPA mRNA表达减少(P <0.01)。结论:人乳腺癌细胞MDA-MB-231存在Hedgehog信号转导通路的激活,活化的Hegehog信号通路可通过调控c-jun、MMP-9和uPA的表达,促进乳癌细胞的侵袭转移。
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