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目的探讨在梗死心肌组织中S100A1、乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶的变化及其意义方法1.随机选取92只SD雄性大鼠,通过结扎冠状动脉左前降支,分为正常对照组(CON),假手术组(Sham),冠脉结扎15min、30min、1h、3h、6h和9h组,应用HE染色、Masson染色、免疫组织化学、免疫荧光、ELISA和Western blotting,检测S100A1,CKMB和LDH在各组心肌组织及血液内的表达差异。2.选取30例尸检心肌标本,分为无梗死组、可疑梗死组和心肌梗死组,应用免疫组织化学法和Western blotting检测S100A1、CKMB和LDH在心肌组织内的表达。结果1.动物实验结果:HE染色与Masson染色显示结扎后9h光镜下心肌出现组织淡染;CKMB免疫荧光结果显示CKMB在CON组与Sham中均表达正常,而从冠脉结扎1h开始出现明显减弱,直至9h时,出现大片表达缺失。免疫组化显示CKMB在Sham组阳性表达较CON组略有减少,而在冠脉结扎30min至3h开始出现下降,在6h以后下降更加明显,与CON组相比均有显著性差异(P<0.05)。血清中CKMB的表达进行检测显示CKMB在冠状动脉结扎15min时有轻微上升趋势,在6h后表达显著增加(P<0.05);LDH免疫荧光显示CON与Sham组中均表达正常,而从冠脉结扎30min开始出现明显减弱,随着冠脉结扎时间的增加荧光强度逐渐减弱,直至9h时,出现大片表达缺失。LDH在冠脉结扎15min时表达开始下降,结扎心肌缺血1h时可看到较为明显的下降趋势,随着心肌缺血时间的增加,LDH整体水平上呈现下降的趋势,各时间段LDH表达量与CON组相比,都有统计学意义(P<0.05)。血清中LDH在冠状动脉结扎15min时表达增加,结扎心肌缺血3h时显著增加,而在6h与9h时趋于稳定的高表达状态。各时间段的LDH表达量与CON相比,都有统计学意义(P<0.05);S100A1免疫荧光与免疫组化结果显示,与CON组相比,S100A1在Sham组中的表达量并无明显变化;而在冠脉结扎15min时表达有明显的下降趋势(P<0.05),在结扎冠脉心肌缺血6h时S100A1表达量达到低峰值,可看到较为明显的下降趋势,随着心肌缺血时间的增加,S100A1整体水平上呈现下降的趋势。血清中S100A1在冠状动脉结扎15min时血浆中的浓度有所增加,在结扎冠脉心肌缺血3h时显著增加,在随后的6h及9h的时间段中,S100A1的浓度持续升高,整体呈现上升的趋势。与CON组相比,各组血浆中S100A1的浓度显著增加,均有统计学意义(P<0.05)。Western blotting检测显示在CON、Sham和15min时,LDH的蛋白表达水平基本持平,30min开始表达下降,6h时表达显著降低。CKMB的蛋白表达在15min即开始降低,3h达实验组内最大水平,但是随即出现表达升高,总体梗死组均低于CON组与Sham组。在冠脉结扎后15min S100A1出现表达下调,30min下调明显,总体达降低,上述所有差异均有统计学意义(P<0.05)。2.人体心肌组织实验结果:无梗死组冠状动脉和心肌无病变;心肌梗死组和可疑梗死组,可见冠状动脉管腔狭窄>50%,可疑梗死组有梗死的基础,但无梗死的组织学变化。免疫组化和Western blotting检测均可见,心肌梗死组S100A1、LDH和CKMB染色的光密度值均明显低于无梗死组(P<0.05),可疑梗死组S100A1和CKMB光密度值同样低于无梗死组(P<0.05),S100A1和LDH仍高于心肌梗死组(P<0.05)。结论1.S100A1、LDH和CKMB在心肌组织内的表达水平随心肌梗死时间的延长呈下降趋势;2.通过检测心肌细胞S100A1、LDH和CKMB表达,可能有助于急性心肌梗死的判断。