中药纳米药物载体的制备及性质研究

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中医中药在我国已有几千年历史,中药治病强身、调理身体和处理伤口得到广泛认同。黄芩苷是从黄芩根中提取得到,具有抗菌、解热、抗心律失常、调节血脂等疗效,近期研究表明黄芩苷还具有抗肿瘤作用。鸦胆子油对各期癌症例如食道癌、胃癌、肠癌和肝癌的疗效极佳。但是黄芩苷的脂溶性及水溶性均很差,而鸦胆子油是从鸦胆子果实中提取的脂肪油,两种药物的溶解特性限制了其生物利用度。  为了改善黄芩苷和鸦胆子油的溶解性,增强其利用率,本文将药物包裹在脂质体或溶致液晶纳米粒分散体中,使用动态光散射(DLS)、紫外分光光度计、冷冻刻蚀透射电镜(Cryo-TEM)以及小角X射线散射(SAXS)考察纳米载体的保存稳定性、包封率、载药量、载体结构以及释放模式。并对制备得到的药物载体进行部分细胞实验包括细胞毒性(MTT)、细胞摄取及细胞凋亡实验。  1)黄芩苷脂质体:用PBS溶液使黄芩苷增溶,并用薄膜蒸发法制备黄芩苷脂质体,并通过正交实验对脂质体配方进行优化,以平均粒径、分散系数、Zeta电位、包封率及载药量为指标,确定最佳配方。通过在胆固醇琥珀酸单酯上引入聚乙二醇以及叶酸分子,得到胆固醇琥珀酸单酯聚乙二醇衍生物以及其叶酸衍生物,对制备得到的黄芩苷脂质体进行叶酸靶向修饰,获得黄芩苷长循环脂质体以及黄芩苷叶酸靶向脂质体。进一步研究了黄芩苷脂质体,黄芩苷长循环脂质体及黄芩苷叶酸靶向脂质体的物理化学性质和部分细胞实验(体外细胞毒性实验,细胞形态观察以及以罗丹明为荧光探针,研究HeLa细胞对叶酸靶向脂质体的摄取情况)。细胞毒性(MTT)和细胞摄取实验(cell uptake)证明,连接叶酸后的载药脂质体具有明显的靶向性,与非靶向脂质体相比,具有更强的细胞毒性,能够快速进入细胞内。  2)空白溶致液晶纳米粒分散体配方筛选:研究脂质配比及制备工艺顺序对空白溶致液晶纳米粒分散体的影响,以平均粒径、分散系数、Zeta电位、包封率及载药量为指标,筛选得到最佳脂质配比以及工艺条件。  3)黄芩苷溶致液晶纳米粒分散体:通过PBS溶液对黄芩苷增溶,得到黄芩苷PBS水溶液,并以其为亲水性模型药物,考察溶致液晶纳米粒分散体对亲水性药物的包裹情况。并研究黄芩苷溶致液晶纳米粒分散体的各种物理化学性质以及部分细胞实验包括细胞毒性(MTT)和细胞凋亡,并验证了溶致液晶纳米粒分散体能大大提高黄芩苷的包封率以及稳定性,并且增加黄芩苷的细胞毒性,以及诱导细胞发生凋亡的能力。  4)鸦胆子油溶致液晶纳米粒分散体:以亲脂性鸦胆子油为模型药物,考察溶致液晶纳米粒分散体对亲脂性药物的包裹情况。并研究其各种物理化学性质以及部分细胞实验包括细胞毒性(MTT)和细胞凋亡,验证了溶致液晶纳米粒分散体具有缓释性,而且包裹在溶致液晶纳米粒分散体中的鸦胆子油的细胞毒性比未包裹的要大得多,说明溶致液晶纳米粒分散体的包裹可以提高鸦胆子油的溶解性,使其更容易进入细胞,增强细胞毒性以及诱导细胞发生凋亡的能力。  5)黄芩苷鹏胆子油溶致液晶纳米粒分散体:尝试将黄芩苷和鸦胆子油共同包载在溶致液晶纳米粒分散体中,研究获得的黄芩苷/鸦胆子油溶致液晶纳米粒分散体配方的物理化学性质以及联合用药后对细胞毒性以及细胞凋亡的影响。计算黄芩苷/鸦胆子油联合作用系数CI为0.73,小于1,说明黄芩苷和鸦胆子油共同包裹在溶致液晶纳米粒分散体纳米粒分散体后有协同作用,溶致液晶纳米粒分散体纳米粒分散体能包裹水油两性药物的特点有助于进一步提高中药单体的生物利用率。
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