【摘 要】
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目的：探究体外转染克老素(Klotho，KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。 方法：用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因
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目的：探究体外转染克老素(Klotho，KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。 方法：用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞，并建立DEX诱导凋亡的细胞模型。运用荧光倒置显微镜观察重组腺病毒的转染效果，qPCR与Westernblot法分析KLmRNA和蛋白表达情况；CCK-8法检测不同浓度DEX作用于MC3T3-E1细胞后的存活率及各研究组细胞的生存情况；流式细胞仪分析各研究组细胞的凋亡率；qPCR与Western blot分析凋亡标志物的mRNA、蛋白表达；免疫荧光分析caspase-9的荧光蛋白表达情况。 结果：重组腺病毒成功感染MC3T3-E1成骨细胞，KL组和KL+DEX组的KL mRNA与蛋白表达量较非转染组明显升高。利用CCK-8法成功检测出DEX的适宜干预浓度为2.0 mmol·L-1DEX组、GFP+DEX组较对照组细胞存活率明显降低、凋亡率明显增加，促凋亡因子Bax的mRNA与蛋白表达增加而抗凋亡因子Bcl-2表达降低;KL组与KL+DEX组其细胞存活率、凋亡率较DEX组均明显改善，促凋亡因子Bax的mRNA与蛋白表达降低而抗凋亡因子Bcl-2表达增加。 结论：大剂量DEX的运用能够诱发MC3T3-E1成骨细胞凋亡，上调KL表达具有抵抗DEX诱导成骨细胞凋亡的作用，提示上调KL表达可改善糖皮质激素诱导性骨质疏松，为大剂量使用糖皮质激素所致医源性骨质疏松的治疗提供新的靶点。
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