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目的在女性的恶性肿瘤中，乳腺癌占据着重要首发地位，乳腺癌淋巴转移，是最常见的转移途径，是决定乳腺癌分期和选择治疗方案最关键的因素之一。因此在乳腺癌的诊断与治疗过程中，如何能够早期检测和控制淋巴转移则就成为了乳腺癌防治的关键环节。目前研究已发现,磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号转导通路在肿瘤发生发展中起着关键作用，其中AKT，也被称为蛋白激酶B(protein kinase B, PKB)，是胞内关键的效应蛋白，AKT的磷酸化在乳腺癌的发生、发展，浸润转移中起着非常重要的作用。抑癌因子PTEN是目前研究最多的一个PI3K/AKT信号转导通路的一个逆向调控因子，PTEN具有双重磷酸酶活性，通过PIP3调节包括AKT在内的许多下游信号蛋白，抑制肿瘤的发生，发展。血管内皮生长因子C(vascular en-dothelial growth factor-C， VEGF-C)是目前研究最广泛的促淋巴管生成因子，它能够诱导肿瘤的淋巴管生成和淋巴道转移，在淋巴道转移过程中起着至关重要的作用，乳腺癌的淋巴转移中可能存在PI3K/AKT/VEGF-C信号转导通路。本研究旨在探讨PI3K/AKT信号转导通路与乳腺癌淋巴转移的关系，进一步阐明乳腺癌淋巴转移的信号转导机制，有可能会成为抑制乳腺癌淋巴转移的一个新靶点。材料和方法收集2011年7月至2012年12月，泰山医学医学院附属医院普外科乳腺癌手术标本60例，以乳腺癌石蜡标本和新鲜标本为研究对象，采用免疫组织化学法、Western-blot检测与乳腺癌淋巴管生成及转移的相关调控因子VEGF-C、以及P-AKT(Thr308)、P-AKT(Ser473)和抑癌因子PTEN蛋白水平的表达；RT-PCR实验技术检测标本VEGF-C、P-AKT、PTEN基因水平的表达，分析AKT磷酸化与淋巴管生长因子、淋巴结转移的关系。160例乳腺癌组织标本，石蜡包埋，切片厚4μmm，免疫组化法检测VEGF-C、以及P-AKT(Thr308)、P-AKT(Ser473)和抑癌因子PTEN蛋白水平的表达。2选取乳腺浸润性导管癌新鲜标本20例， Western-blot检测VEGF-C、P-AKT(Thr308)、 P-AKT(Ser473)和抑癌因子PTEN蛋白水平的表达。3选取乳腺浸润性导管癌新鲜标本20例， RT-PCR实验技术检测标本VEGF-C及AKT、 PTEN基因水平的表达。4实验所有数据均采用SPSS13.0统计软件进行分析。根据资料类型和统计目的不同分别做四格表χ~2检验，行×列表χ~2检验，Spearman相关分析，两个独立样本检验。P<0.05为差异有统计学意义。分析PTEN对PI3K/AKT信号转导通路的作用，磷酸化AKT对乳腺癌淋巴转移的影响，分析磷酸化AKT， PTEN与淋巴管生成因子VEGF-C的相关作用，探讨PI3K/AKT信号转导通路在乳腺癌淋巴转移中的作用。结果1P-AKT、 PTEN及VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及其相关性60例乳腺癌标本中, P-AKT308的阳性表达率为70%，P-AKT473的阳性表达率为65%。有淋巴结转移组的P-AKT308、P-AKT473表达率均明显高于无淋巴结转移组表达率(χ~2=15.660， P=0.000； χ~2=10.280， P=0.001)。P-AKT308和P-AKT473表达与乳腺癌大小、组织分型无关(P>0.05)。VEGF-C阳性表达率为68.3%，PTEN的阳性表达率为56.7%。有淋巴结转移组的VEGF-C表达率明显高于无淋巴结转移组表达(χ~2=20.863，P=0.000)。有淋巴结转移组的PTEN表达率明显低于无淋巴结转移组表达率(χ~2=12.996，P=0.000)。VEGF-C和PTEN表达与乳腺癌大小、组织分型无关(P>0.05)。在P-AKT308表达阳性的病例中VEGF-C阳性表达率为81%，PTEN阳性表达率为45%；在P-AKT308表达阴性的病例中VEGF-C阳性表达率为38.9%， PTEN阳性表达率为83%，经Spearman相关分析， P-AKT308与VEGF-C表达成正相关(r=0.511，p<0.05)，与PTEN表达成负相关(r=-0.502，p<0.05)。在P-AKT473表达阳性的病例中VEGF-C阳性表达率为82.1%，PTEN阳性表达率为48.7%；在P-AKT473表达阴性的病例中VEGF-C阳性表达率为42.9%, PTEN阳性表达率为71%，经Spearman相关分析，P-AKT473与VEGF-C表达成正相关(r=0.505， p<0.05)。 P-AKT473与PTEN表达成负相关(r=-0.334，p<0.05)。2P-AKT、 PTEN和VEGF-C蛋白在乳腺癌组织中的表达20例人乳腺浸润性导管癌新鲜标本中，其中12例伴有淋巴结转移，8例不伴有淋巴结转移，在淋巴结转移阳性的病例中， P-AKT308，P-AKT473，VEGF-C蛋白均有表达，PTEN有3例不表达。在淋巴结转移阴性的病例中，P-AKT308有2例不表达，P-AKT473有3例不表达，VEGF-C蛋白有1例不表达，而PTEN均有表达。在20例人乳腺浸润性导管癌中，P-AKT308、P-AKT473、VEGF-C和PTEN蛋白在两组不同的淋巴转移组上均有显著性差异(U=-2.200， P=0.025；U=-2.512， P=0.010； U=-2.394， P=0.016； U=-2.474， P=0.012)。3AKT、 PTEN及VEGF-C mRNA在乳腺癌组织中的表达20例人乳腺浸润性导管癌新鲜标本中，其中12例伴有淋巴结转移，8例不伴有淋巴结转移，在淋巴结转移阳性的病例中，AKT基因与VEGF-C基因均有表达，PTEN有3例不表达。在淋巴结转移阴性的病例中，AKT基因有1例不表达，VEGF-C基因有3例不表达，而PTEN基因均有表达。在20例乳腺浸润性导管癌中， AKT、VEGF-C和PTEN基因在乳腺癌有淋巴转移组和无淋巴转移组的表达均有显著性差异(U=-3.703，P<0.05；U=-3.632， P<0.05； U=-3.709， P<0.05)。结论1P-AKT、VEGF-C在有淋巴结转移乳腺癌组织中的表达均明显高于无淋巴结转移组，PTEN在有淋巴结转移乳腺癌组织中的表达明显低于无淋巴结转移组，提示磷酸化AKT促进乳腺癌淋巴转移，而PTEN起负调控作用。2在乳腺癌组织中，磷酸化AKT与VEGF-C的表达呈正相关，与PTEN呈负相关，提示AKT的磷酸化可能促进了VEGF-C的表达，进一步促进了乳腺癌淋巴转移。3在乳腺癌组织内，AKT的磷酸化参与启动胞内PI3K/AKT信号转导通路刺激肿瘤细胞分泌细胞因子，通过与VEGF-C/VEGFR-3信号通路的交叉对话，促进了乳腺癌的淋巴管生成与淋巴转移，可能成为乳腺癌淋巴转移的作用机制。