血浆胺类活性物质同时测定及寒热药性对其影响初探

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本文建立了血浆胺类生物活性物质(肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、五-羟色胺、组胺、谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、甘氨酸、三碘甲状腺原氨酸)的柱前荧光衍生-高效液相色谱测定方法。在碱性条件下,被测物与丹磺酰氯生成荧光产物,用高效液相色谱-荧光法检测定量。对流动相的组成、梯度,反应时间和温度等检测条件进行优化,确定了最佳的分析条件。色谱柱:Thermo Hypersil-Keystone C18 ODS(250×4.6,5 μm);流动相B:甲醇:乙腈=2:3;流动相A:醋酸盐缓冲液(20mmol/l);流速:1ml/min;梯度洗脱:0-80min,从15%逐渐上升到90%并保留10分钟;柱温:30℃;荧光检测器:激发波长为350 nm;发射波长为510 nm;反应时间:20分钟;反应温度:80℃。血浆中通过加入30%的三氯乙酸去蛋白。本法具有:方法简便快速,灵敏准确和操作步骤较简单等特点。适宜于血浆中胺类生物活性物质的测定。 用本法初步测定了分别服用五种寒性和五种热性中药后小鼠血浆中十个胺类生物活性物质,并与正常小鼠的测定结果进行了比较。得到的初步结论是寒性药对血浆中大部分指标有增强作用,热性药对血浆中大部分指标有抑制作用;寒热药性对血浆液中多数胺类生物活性物质有显著影响,与以往寒热药性对少数指标的研究比较有一定的拓展。
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