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研究背景： 阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD),又称为老年性痴呆,是老年人常见的神经系统变性疾病。AD的病因尚未明确,可能与遗传、年龄、环境、神经递质系统功能障碍、神经毒性损伤、炎症反应等有关,其中脑内的慢性炎症反应学说一直备受研究者关注。众多研究表明,IL-18作为一种炎症因子,可能参与了AD的病理过程。IL-18参与AD的发病可能是通过激活的小胶质细胞释放IL-18等炎症因子,而IL-18又能反馈性促进β淀粉样蛋白沉积、激活小胶质细胞,从而导致AD的发生。已有文献报道,IL-18基因启动子区-137G/C(RS187238)、-607C/A(RS1946518)的单核苷酸多态性(SNP)可能与AD的发病有密切关系,然而这方面的研究在各族人群中研究结果并不一致。大量研究表明,ApoE是AD的相关基因,携带ApoEε4等位基因会增加AD的发病风险,而ε2则可能对AD起保护作用。 研究目的： 本实验通过测定AD患者和正常对照组外周血清中IL-18水平,ApoE基因,IL-18启动子区-137、-607的SNP,比较中国汉族人群中散发型AD与正常对照组外周血清中IL-18表达水平的差异及ApoEε4、-137C/A,-607G/C的基因型分布频率的差异,并分析-137、-607的SNP与IL-18表达水平的相关性,以探讨IL-18是否是AD的相关基因及IL-18在AD发病机制中所起的作用。 方法： 选取2011年5月-2012年12月广州医学院第二附属医院神经内科门诊和住院的AD患者73例,年龄为61～83岁,其中男性38例,女性35例。对照组为正常老年人,均来自于广州医学院第二附属医院健康体检中心,共51例,年龄为64～83岁,其中男性26例,女性25例,根据MMSE评分和教育年限将AD组分为轻、中、重度三组,根据是否携带有ApoEε4等位基因,将所有受试者分为ε4阳性组和ε4阴性组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)直接检测AD组和正常对照组的外周血清中的IL-18水平。采用聚合酶链式反应(PCR)扩增AD组和正常对照组的目的基因,并直接测序检测基因型,采用SPSS18.0统计软件完成数据处理,各组数值均采用均数±标准差(±S)表示,定量资料采用成组t检验进行组间比较,定性资料采用χ检验,IL-18的含量与IL-18SNP的相关性分析采用Peason相关分析,均以P<0.05表示差异有一般统计学意义,P<0.01表示有显著统计学意义。 结果： 1.AD组和正常对照组年龄、性别匹配,有可比性。 2.AD组和正常对照组基线资料(BMI、坐位血压、空腹血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白)无统计学意义(P>0.05)。 3.正常对照组外周血清中IL-18的量为:226.02±108.73pg/ml,AD组为:338.75±135.31pg/ml,AD组外周血清IL-18的含量高于对照组,且差异有统计学意义(t=4.938,p<0.001)。 4.AD患者轻、中、重度组外周血清IL-18的含量分别为:轻度283.73±86.63pg/ml,中度360.29±130.72pg/ml,重度555.20±192.22pg/ml;中度组外周血中IL-18的含量高于轻度组,重度组分别高于轻度和中度组,且差异均有统计学意义(P值分别为:p=0.006,p<0.001,p=0.007) 5.外周血清IL-18的含量与AD患者的MMSE评分呈负相关(r=0.490,p<0.001),即与AD患者疾病的严重程度呈正相关。 6.IL-18-137G/C基因型在正常对照组的分布频率分别是GG(43.1％)、GC(51.0%)、CC(5.9%),在AD组的分布频率分别是GG(68.6%)、GC(29.4%)、CC(2.0%),-137GG型在AD组分布频率高于正常对照组,且差异有统计学意义(χ2=6.916,P=0.031)ApoEε4阳性组中,AD组-137GG型的分布频率高于正常对照组(χ2=6.720,P=0.01),ApoEε4阴性组中,各基因型的分布频率差异无统计学意义(χ2=0.277,P=0.599)。 7.IL-18-607C/A基因型在正常对照组的分布频率分别是CC(15.7%)、CA(51.0%)、AA(33.3%),在AD组的分布频率分别是CC(33.3%)、CA(47.1%)、AA(19.6%),经χ2检验(χ2=5.135,P=0.077),AD组与正常对照组的各基因型的分布频率差异无统计学意义,在ApoEε4阳性组和阴性组中,差异亦无统计学意义。AD组中的等位基因C的分布频率高于正常对照组(χ2=5.022,P=0.025)。 8.在AD患者中的-137GG组与-137GC+CC组的外周血清IL-18的含量分别为:381.66±157pg/ml、281±98.85pg/ml,-137GG型AD患者外周血清IL-18的表达高于-137GC型和-137CC型的AD患者(t=2.343,p=0.023),差异具有统计学意义。在AD组-607以及正常对照组-137和-607各基因型的外周血IL-18表达均无明显差异。 结论： 1.在中国汉族人群中,散发型AD患者外周血中IL-18水平较正常人升高,且与疾病严重程度有关。 2.本研究中,IL-18-137GG型可使散发型AD患者外周血IL-18的表达升高,可能会增加散发型AD的发病风险,且与携带ApoEε4等位基因相关,-607各基因型分布频率在AD组和正常对照组差异无统计学意义。