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目的:观察脐血单核细胞(cord blood monocyte,CBMC)经不同浓度胆红素孵育后,髓样分化蛋白2(myeloid differentiatial protein 2,MD-2)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor associated factor 6,TRAF6)mRNA基因表达的变化,探讨胆红素对新生儿脐血单核细胞免疫功能的影响。方法:收集10例不同胎龄(37～42周)的新生儿脐血,用纤维蛋白结合法分离单核细胞,流式细胞仪测其纯度。实验分为空白组(A组)、LPS组(B组)、1mg胆红素组(C1组)、2.5mg胆红素组(C2组)、1mg胆红素+LPS组(D1组)、2.5mg胆红素+LPS组(D2组)、6mg胆红素+LPS组(D3组)、9mg胆红素+LPS组(D4组)、12.9mg胆红素+LPS组(D5组)、18mg胆红素+LPS组(D6组)。采用RT-PCR的方法测定MD-2、TRAF6 mRNA基因表达的水平,同时对二者作相关性分析。结果:1、胆红素对CBMC MD-2 mRNA基因表达的影响:①LPS组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);1mg/dl、2.5mg/dl胆红素组分别与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。即LPS及低浓度胆红素(1mg/dl、2.5mg/dl)对CBMC MD-2mRNA基因表达水平均无明显影响。②不同浓度胆红素+LPS组与LPS对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度胆红素+LPS组总体比较和组间两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05);将MD-2 mRNA基因表达水平与胆红素浓度进行相关性分析,二者呈负相关(r =-0.2947,P<0.05)。即胆红素有抑制单核细胞MD-2 mRNA基因表达的趋势,浓度越高,抑制越明显。2、胆红素对CBMC TRAF6 mRNA基因表达的影响:①LPS组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);1mg/dl胆红素组、2.5 mg/dl胆红素组分别与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。即LPS及低浓度胆红素对CBMC TRAF6 mRNA基因表达水平均无明显影响。②1mg/dl胆红素+LPS组、2.5mg/dl胆红素+LPS组TRAF6 mRNA基因表达水平分别与LPS对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);6mg/dl胆红素+LPS组、18mg/dl胆红素+LPS组CBMC TRAF6 mRNA基因表达水平分别与LPS组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。D1、D2、D3、D4、D5、D6组CBMC TRAF6 mRNA基因表达水平总体比较,差异有统计学意义(M =774,P<0.05)。组间两两比较结果显示,D1与D2差异无统计学意义(P>0.05);D1与D3、D4、D5、D6差异有统计学意义(P<0.05);D2与D3、D4、D5、D6差异有统计学意义(P<0.05);D3、D4、D5、D6差异无统计学意义(P>0.05)。将TRAF6 mRNA基因表达水平与胆红素浓度进行相关性分析,二者呈负相关(r=-0.3948 ,P<0.01)。即低浓度胆红素+LPS有刺激CBMC TRAF6 mRNA基因表达作用,而高浓度胆红素则有抑制其表达的作用,胆红素浓度越高,抑制作用越明显。3、MD-2和TRAF6相关性分析:胆红素作用后MD-2和TRAF6 mRNA基因表达呈正相关(r = 0.3108,P<0.05)。即在不同浓度胆红素作用下,随着MD-2 mRNA基因表达率的降低,TRAF6 mRNA基因表达率随之降低。结论:1、低浓度的胆红素对CBMC MD-2、TRAF6 mRNA的基因表达抑制趋势不明显,或有刺激其表达趋势,高浓度的胆红素则有抑制其表达的趋势,随着胆红素浓度的升高,抑制趋势越明显,表明高浓度的胆红素具有明显的免疫毒性,可导致细胞免疫功能的下降。2、MD-2 mRNA基因表达水平与TRAF6 mRNA基因表达水平呈正相关。即在不同浓度胆红素作用下,随着MD-2 mRNA基因表达率的降低,TRAF6 mRNA基因表达率随之降低。提示TRAF6和MD-2在单核细胞信号传导途径中均有表达并参与了新生儿高胆红素血症的免疫机制。