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活性肽是广泛存在于自然界生物体内的一类具有特殊生物学功能的多肽，有关活性肽研究的热点主要集中在活性肽抗菌抗病毒的研究，抗菌活性肽作用机理的研究是近年来的热点之一。膜片钳技术自发明以来演化出适合不同研究需要的多种测量模式，并成为现代膜生物学和电生理研究的重要手段。利用该技术可测量局部膜片跨膜电流，从而反映细胞膜离子通道启闭情况。本实验以5v直流电刺激东北林蛙背部皮肤收集皮肤分泌物，经葡聚糖凝胶层析(Sephadex G)及高效液相色谱(HPLC)分离、纯化，获得11个东北林蛙皮肤活性肽dybowskiiⅠ～ⅩⅠ，富集峰面积值大的组分dybowskiiⅠ～Ⅳ，制备dybowskiiⅠ～Ⅳ冻干粉，分别用电极外液配制成浓度为20ug/ml、100ug/ml、500ug/ml的活性肽dybowskiiⅠ～Ⅳ溶液。吸附穿孔模式的膜片钳实验结果显示东北林蛙皮肤活性肽在20ug/ml至500ug/ml的范围内对人乳腺癌细胞(MCF-7)膜有损伤作用，活性肽可使封接电阻的降低，推测可能形成在细胞物理理孔洞，该损伤作用依东北林蛙皮肤活性肽浓度的升高而逐渐加强。以同样条件和方法并未检测到500ug/ml活性肽造成小鼠小肠平滑肌细胞膜的物理孔洞。传统式全细胞膜片钳实验结果显示浓度为500ug/ml活性肽对MCF-7细胞的延迟整流钾离子通道具有抑制作用，使其电流密度从29.65±4.26pA/pF下降至23.15±3.25pA/pF(n=5，P＜0.05)；峰值电流密度下降幅度为21.93％。而对小鼠小肠平滑肌细胞的延迟整流钾离子通道却几乎没有抑制作用，电流密度下降幅度为0.03％(n=5，P＞0.05)。浓度为500ug/ml活性肽对MCF-7细胞的瞬时内向Na离子通道具有抑制作用，使其电流密度从110±1.26pA/pF下降至80.15±9.65pA/pF(n=4，P＜0.05)；峰值电流密度下降幅度为27.26％。单一组分dybowskiiⅠ；dybowskiiⅡ；dybowstdiⅢ；dyhowskiiⅣ对MCF-7细胞的延迟整流钾离子电流有不同程度的抑制作用。比较加入活性肽前后MCF-7细胞的电压门控性Na~+，K~+电流的改变为定量地描述细胞损伤程度提供了电生理学指标，综上结果表明东北林蛙皮肤活性肽可能具有抗肿瘤细胞的作用。