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氧氟沙星(Ofloxacin，OFL)是第三代喹诺酮类手性抗生素，通过抑制细菌脱氧核糖核酸(DNA)的合成而达到抑菌作用；具有广谱性、吸收好、疗效高、易于贮存且价格便宜等优点，是广泛使用的人兽共用药。但是长期滥用喹诺酮类抗生素导致病菌耐药性增强，其药物残留所产生的各种慢性、蓄积毒性，对人的身体健康和生态环境也造成巨大危害。我国动物源性食品常因药残超标而出口贸易受到损害，给相关产业和我国的国际形象都造成很大的负面影响。因而建立高效、快速、高灵敏的分析方法检测与监控其药物残留具有十分重要的意义。而手性物质进入生态环境后，在被各种生物摄取吸收、代谢转化等一切生命活动过程中往往存在对映体选择性；手性物质的生物效应，包括致畸、致癌、致突变、内分泌干扰活性等都呈现手性选择性。所以，只有在对映体形态水平上研究手性污染物的分离、分析、环境变化等问题才能明确它们在环境中的行为和效应，从而就其对人类健康和生态系统的风险性作出准确的评价。而建立快速、准确、灵敏、直观的手性物质对映体分析方法是深入开展手性污染物环境问题的关键技术。本研究旨在：1、建立氧氟沙星荧光偏振免疫法及毛细管电泳免疫分析法(激光诱导荧光检测，LIF)等高灵敏度的分析方法，并比较这两种方法的特性。2、以手性氧氟沙星荧光示踪物和手性氧氟沙星抗体为材料，通过毛细管电泳免疫分析方法，在毛细管电泳拆分条件下研究手性识别规律。具体研究内容与结果如下：
(1)分别合成短手臂的异硫氰酸荧光素乙二胺(EDF)和长手臂的异硫氰酸荧光素己二胺(HDF)两种荧光素中间体，再以氧氟沙星(同源抗原)和各林沙星(gelxacin，GLXC，异源抗原)经改良的混合酸酐法合成了四种荧光示踪物，分别为OFL-HDF，OFL-EDF，GLXC-HDF和GLXC-EDF，并通过荧光偏振免疫技术和质谱技术鉴定上述四种示踪物的活性及结构。
(2)采用荧光偏振免疫技术，以△FP/IC50(半抑制浓度)为指标比较上述四种示踪物的免疫反应灵敏度，结果发现GLXC-HDF的灵敏度最高，因而以GLXC-HDF为荧光示踪物建立了氧氟沙星的荧光偏振免疫分析方法。该方法所得IC50为4.45ng/mL，检出限(IC10)为0.24ng/mL，线性范围(IC20～IC80)为0.66～195.37ng/mL，三个梯度浓度的标准添加回收率在94.80～96.78％之间，相对标准偏差在3.79～6.12%之间。
(3)建立了以OFL-HDF为荧光示踪物的氧氟沙星毛细管电泳免疫分析法(LIF检测)。毛细管电泳优化的最佳条件为：200mM硼酸盐(pH9.0)缓冲液，未涂层毛细管(50μmI.D*40cm有效长度)，分离电压为25kV，压力进样0.5psi*5s，在此条件下游离氧氟沙星示踪物与其免疫复合物在6min内得到完全分离。该方法线性范围为0.03～12ng/mL，最低检出限(S/N=3)为0.012ng/mL，不同浓度的标准添加回收率在97～105%之间，相对标准偏差在3.92～6.45%之间。
(4)以BSA、β-CD、HP-β-CD、SBE-β-CD、DM-β-CD为手性拆分剂，在偏碱性条件下进行了毛细管电泳法手性拆分，结果发现以HP-β-CD为手性拆分剂，OFL-HDF获得良好的基线分离。在此手性拆分条件下，以毛细管电泳免疫分析法研究了手性抗原抗体的识别规律。消旋氧氟沙星抗体和左旋氧氟沙星抗体分别与消旋，左旋氧氟沙星荧光示踪物反应，结果发现左旋氧氟沙星抗体和消旋氧氟沙星抗体都既能识别左旋氧氟沙星也能识别右旋氧氟沙星抗原，但都优先识别左旋氧氟沙星。