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铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)是常见的水华蓝藻。本实验室的前期研究发现，M.aeruginosa PCC7806胞外分泌蛋白MrpC呈纳米长纤维网状结构，因而具有很好的细胞悬浮特性。进一步研究其丝状结构的形成过程对认识蓝藻水华的形成机制和防治有重要的意义。本论文研究MrpC蛋白在藻细胞内的定位分布及其互作蛋白，可以帮助了解MrpC蛋白的合成组装分泌过程。MrpC是糖蛋白，在mrpC基因的下游有两个含有糖基化转移酶的基因，分别是slpA、slpB基因。敲除slpA、slpB基因对于了解MrpC与SlpA、SlpB之间的关系具有重要意义。本文研究的主要内容和结果如下: (1)利用免疫胶体金标记技术定位铜绿微囊藻PCC7806的分泌蛋白MrpC，结果发现MrpC主要分布在细胞壁和胶质鞘区及类囊体区中，MrpC蛋白单体在胞内合成组装成丝状蛋白并往胞外转运。从藻细胞的质壁分离电镜照片可以判断MrpC聚合体定位在细胞壁上。 (2)利用免疫共沉淀和酵母双杂交技术筛选MrpC的互作蛋白，但用免疫共沉淀没有成功筛选到MrpC的互作蛋白。用酵母双杂交发现MrpC蛋白能够发生自身相互作用，并且成功筛选到7个可能与MrpC存在相互作用的蛋白。这些蛋白的发现为进一步研究MrpC蛋白的合成组装及分泌过程提供了新的思路。 (3) Glyco是SlpA蛋白C-端保守结构域，具有糖基化转移酶结构域。克隆Glyco基因，构建pGADT7-Glyco载体。将pGADT7-Glyco转化酵母菌Y187，结果显示MrpC与Glyco结构域没有发生相互作用。MrpC与SlpA是否有相互作用，还需要进一步验证。 (4)分别构建slpA、slpB的同源整合敲除载体，通过电击转化将载体转入野生藻中，但没有筛选到突变藻，需要对实验进行优化和改进。