小分子化合物与DNA的相互作用及壳聚糖的电化学研究

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DNA是生物体中重要的一类生物大分子,对生命遗传密码的翻译、转录、复制起着非常重要的作用。而DNA与识别分子的相互作用研究成为生命科学研究中的热门领域之一。电化学法和光谱法两种研究技术的有机结合对于深刻理解DNA与识别分子相互作用的机理具有重要意义。壳聚糖(CTS)是一种天然碱性高分子多糖,其特殊的分子结构使得壳聚糖对许多离子、有机物、生物分子等具有离子交换、螯合、吸附等作用,被广泛应用于化学领域。然而目前对于CTS含量测定的报道较少,而用电化学方法直接测定CTS未见报道。本文利用电化学,紫外-可见光谱和荧光光谱法研究了几种小分子化合物与DNA的相互作用机理。并对壳聚糖的电化学行为进行了研究。论文主要包括了以下几个方面: (1)利用电化学,紫外-可见光谱法研究了CTZAMB-Cu(Ⅱ)络合物与鱼精子DNA(hsDNA)的相互作用及其机理,提出了两者之间的相互作用是通过CTZAMB-Cu(Ⅱ)与DNA外部的磷酸基团发生静电作用实现的。两者形成新的化合物,从而使得络合物的峰电流降低,峰电流在一定范围内与DNA的浓度成线性关系。利用该方法进行了DNA含量测定,线性范围为3.0×10-7-7.0×10-6g/mL,检出限为1.0×10-7g/mL。 (2)利用电化学,紫外-可见光谱,荧光光谱法研究了BZ与鱼精子DNA(hsDNA)的相互作用及其机理,提出了两者之间的相互作用是通过BZ部分插入DNA双螺旋中实现的。两者形成新的化合物,从而使得BZ的峰电流降低,峰电流在一定范围内与DNA的浓度成线性关系。利用该方法进行了DNA含量测定,线性范围为7.0×10-8-6.0×10-6g/mL,检出限为3.0×10-8g/mL。 (3)研究了壳聚糖(CTS)在0.05mo1/L邻苯二甲酸氢钾(KHP)缓冲溶液(pH2.5)中的电化学行为、最佳测定条件及其电极反应机理。实验证实了CTS在KHP缓冲液中的降解和CTS降解产物在HMDE上的氧化还原。将该方法用于真实样品中壳聚糖的定量测定,线性范围为5.0×10-7-1.5×10-5g/mL,检出限为1.0×10-7g/mL。
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