【摘 要】
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营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal proteins,VIPs)是苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)在对数生长中期分泌的一类新型杀虫毒蛋白,它对鳞翅目昆虫具有较广谱
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营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal proteins,VIPs)是苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)在对数生长中期分泌的一类新型杀虫毒蛋白,它对鳞翅目昆虫具有较广谱的杀虫活性.Vip3A通过诱发细胞凋亡,最终导致昆虫死亡,这种作用机理与Bt杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,ICPs)的作用机理完全不同.该文对该实验室保存的菌株进行vip3A基因的检测,克隆了其中2个vip3A基因并在大肠杆菌中得到高效表达.通过信号肽缺失实验研究了在大肠杆菌和Bt中Vip3A蛋白的信号肽功能.用ICPs基因的启动子和Shine-Dalgarno(SD)序列对vip3A基因的相应序列进行替换或连接以改变其表达时相和提高表达量,可用于构建了新型高效的Bt工程菌.实验结果显示,vip184基因连接不同类型ICPs基因(cry3A、cry1A和cyt1A)的启动子和SD序列时,与带有自身启动子和SD序列的vip184基因在Cry<->B中表达的情况没有任何差别.这可能是因为连接进去的启动子和SD序列不起作用,vip184基因表达时还只是利用自身的启动子和SD序列之故.
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