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花药及花粉的发育是植物有性生殖的基础。目前已发表的雄性不育突变体的基因大约有20多个,但大部分雄性不育基因还没有被克隆出来。
本研究用EMS处理拟南芥Ler野生型种子,筛选获得了95株雄性不育突变体。经过背景纯化,确定其中6株为单位点隐性突变,并对着6株突变体进行了定位。这些雄性不育突变体为深入开展花药和花粉发育分子机理研究奠定了基础。
EC2-214为EMS诱变得到的环境性雄性不育突变体。它的育性受环境湿度的影响,茎和果荚表现为与野生型不同的亮绿色。扫描电镜的结果显示EC2-214的茎和果荚的上表皮没有蜡质的形成,成熟花粉粒表面的含油层的成分有所变异。通过图位克隆的方法对EC2-214进行了基因定位,将其定位在拟南芥第一条染色体BACF1003至染色体顶部700KB的区间内。
ms1502是通过EMS诱变所获得的单基因控制的隐性突变体。细胞学分析的结果显示,突变体在小孢子从四分体释放出后花药绒毡层过早衰亡,小孢子的内容物异常地凝聚,最终无法形成正常的花粉粒。荧光染色的结果显示,花粉外壁基本骨架存在,但结构异常,而且没有可见的花粉内壁。用图位克隆的方法对ms1502进行了基因定位,结果表明MS1502位于拟南芥第四条染色体上分子标记F25I24之间41KB区间内。目前该区间内尚未见到花药发育必需基因(不育基因)的报道,因此MS1502是一个控制花粉发育的新基因。目前对候选基因的分析和互补实验正在进行当中。本项工作为我们克隆花粉发育必需基因MS1502及其深入的功能分析奠定基础。