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研究背景白介素-8(IL-8)属于C-X-C亚家族，已知白介素-8对中性粒细胞有趋化激活作用，对T细胞有趋化作用，可激活嗜碱性粒细胞，并具有促进角化细胞的分裂和趋化、刺激血管的形成和释放前体物质等作用。而上述作用是通过白介素-8的2种不同受体即白介素-8受体α和β来实现的。这两种受体在正常人体内就有表达，病理情况下表达水平增高。血管内皮细胞所受到的力学因素主要有血液流动产生的切应力、血管壁的周向应力以及血液的法向应力。其中切应力和周向应力对于内皮细胞功能的调节尤为重要。体内实验表明，流体切应力可调节内皮细胞的形态和功能，如细胞的修复、迁移、细胞骨架的重排及内皮细胞与白细胞的相互作用等。体外研究显示，流体切应力可激活内皮细胞内多种信号分子，影响相关基因的转录活性。本研究目的是，通过观察不同大小以及不同强度流体切应力作用下内皮细胞IL-8受体表达的变化，从而探讨切应力诱导的内皮细胞生理生化反应的分子基础，并为进一步研究IL-8与切应力共同作用下内皮细胞力学-化学耦合作用的细胞分子机理提供理论依据。研究方法我们选取EA．Hy926细胞作为实验研究对象，通过形态学观察和表面抗原测定等方法对其进行鉴定。利用自制流室系统提供不同大小流体切应力对内皮细胞进行力学刺激。分别选取5.56、10.02、15.27 dyn/cm~2三组剪应力作用于内皮细胞，每组剪应力作用选取5 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h等时间点对细胞进行样本采集。分别利用RT-PCR技术、荧光显微技术、以及Western blotting技术分别从mRNA水平、蛋白质表达量水平、以及蛋白质表达分布情况，研究两种IL-8R(CXCR1以及CXCR2)的表达变化规律。结果1．在5.56 dyn/cm~2剪应力作用下，与静止组相比，各时间点CXCR1 mRNA与CXCR2 mRNA表达均显著升高(p<0.05)。在10.02 dyn/cm~2剪应力作用下，CXCR1 mRNA表达随时间相对缓慢下降；而CXCR2 mRNA表达在30min出现短暂的升高，然后随着作用时间的延长开始缓慢下降。在15.27 dyn/cm~2剪应力作用下，其CXCR1、CXCR2 mRNA的表达随时间呈现较显著性降低(p<0.01)，当持续作用4 h以上其CXCR2 mRNA表达极低。2．流体切应力促使CXCR1和CXCR2两种IL-8受体重新分布于EA．Hy926细胞胞浆内。流体切应力可以改变CXCR1和CXCR2两种IL-8受体表达强度。3．IL-8蛋白质的表达量与切应力的作用强度有关，如低切应力(5.56 dyn/cm~2)时，IL-8受体(CXCR1与CXCR2)的表达量明显增加，高切应力(15.27dyn/cm~2)时，IL-8受体(CXCR1与CXCR2)表达量有明显降低。结论流体切应力调节IL-8受体表达，低切应力(5.56 dyn/cm~2)使CXCR1和CXCR2 mRNA表达增加、蛋白表达增强：高切应力(15.27 dyn/cm~2)使两种受体表达降低。同时，在流体切应力的作用下，可见两种受体由胞膜转移到胞浆。因此，IL-8受体是内皮细胞力学—化学耦合作用的重要信号分子。