水稻snoRNA及其基因组织的系统研究

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shuiyuwqiao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
核仁小分子RNA(smallnucleolarRNA,snoRNA)是目前已知细胞核内最大的非编码RNA(non-codingRNA,ncRNA)家族,在ncRNA领域中占有重要的研究地位。根据结构和功能特征,snoRNA主要可以分为boxC/D和boxH/ACA两大类,它们分别指导rRNA上特定位点的甲基化和假脲嘧啶化修饰。作为ncRNA,snoRNA的基因组织具有高度多样性:酵母中大多数snoRNA是独立转录的单基因,也有几例独立转录的基因簇;而哺乳动物的snoRNA基因则大多位于内含子中,且“一个内含子只含一个snoRNA”。植物snoRNA的研究开展较晚,早期的生物化学数据指出其rRNA是高度修饰的,相应的其中必然存在大量起指导作用的snoRNA分子。水稻作为单子叶植物的代表,是第二种进行全基因组测序的植物,初步研究已发现一例独特的多个snoRNA位于同一内含子中的现象,因而具有较高的研究价值。 本研究以水稻为对象,考察其中的snoRNA基因及基因组织形式。第一阶段,在水稻基因组数据不全,大规模鉴定平台尚未建立的情况下,利用snoRNA的保守性开展同源搜索,找到了27个新的水稻snoRNA基因,进一步发现它们组成6个snoRNA基因簇,其中就有4个位于内含子区。这为内含子snoRNA基因簇在水稻中存在提供更多例证,从而确立了这种新的snoRNA基因组织形式。同时通过cDNA数据库检索及RT-PCR实验,证明这些簇都是以多顺反子前体转录的;通过引物延伸反应,证明簇内的snoRNA分子能正常成熟;根据snoRNA结构与功能的关系分析,这些snoRNA绝大部分都有确定的功能,对其中三个植物特有snoRNA指导的甲基化修饰位点还通过不同dNTP浓度下的逆转录反应进行了验证。 接着,我们以新建立的计算机RNA组学和实验RNA组学方法为基础,在基因组水平上对水稻snoRNA及其基因组织进行全面深入的研究。分析获得的大量数据发现,水稻snoRNA大部分(83%)以基因簇的形式存在,其中近一半位于内含子中,说明内含子snoRNA基因簇在水稻基因组中大量存在。宿主基因大多与核糖体或核仁相关,且通常是其最大的一个内含子中含有snoRNA基因簇,同一宿主基因一般还存在不含snoRNA基因簇的拷贝。 通过分析比较内含子snoRNA基因簇和非内含子snoRNA基因簇,发现snoRNA基因的局部重复,是snoRNA基因簇尤其是内含子snoRNA基因簇形成的重要机制之一;可能由于基因间隔区比内含子区有更大的弹性和空间来容纳更多的snoRNA基因,非内含子簇可以包含8、9个甚至更多的snoRNA,而内含子snoRNA基因簇一般限于由2-6个基因组成。不少水稻snoRNA基因簇(内含子的和/或非内含子的),在组成上相似。将这些相关的snoRNA基因簇在染色体上定位,发现相当一部份(约50%)落在了对应的染色体重复区域内,说明水稻历史上的染色体重复事件是形成相关snoRNA基因簇的重要原因之一。 除了snoRNA基因簇之外,水稻还存在其它的snoRNA基因组织类型,如单独转录的snoRNA,单个位于内含子中的snoRNA,以及tRNA-snoRNA双顺反子等。水稻snoRNA形成以簇为主,多种基因组织类型并存,内含子snoRNA基因簇大量存在的总体格局。 比较水稻和拟南芥两种植物的snoRNA基因组织显示,snoRNA基因簇是植物snoRNA基因组织的特点;但拟南芥一般是位于基因间隔区的小簇,而在水稻中大簇较常见,且近一半的簇位于内含子区。另外,虽然两种植物分歧比较久远,但其中不少snoRNA簇的基因组成及排列顺序仍有一定的关联性。而在拟南芥仅有的5例位于内含子的情况中就有三例的宿主基因及其内含子中的snoRNA与水稻中的情况完全对应,说明植物snoRNA基因簇产生于早期,且在拟南芥和水稻的祖先就已存在内含子snoRNA(簇),现在所见水稻和拟南芥snoRNA基因组织的区别与它们基因组各自的进化历程与方向有关。 综合分析研究过程中鉴定的大量水稻snoRNA基因,发现它们显示出高度多样性,一是其种类繁多,就boxC/DsnoRNA而言共发现116种,包括各生物间保守的,植物特有的和水稻特有的,是迄今为止在一种生物中发现种类最多的例子,二是大多数snoRNA具有两个或更多拷贝,拷贝间的序列变化有可能导致功能的产生,丢失或改变。对水稻而言,丰富的snoRNA可能是一个基因资源库,为其应付复杂环境,提供一定的遗传物质基础。 snoRNA是细胞内起引导识别作用RNA分子的代表,这类分子一般通过互补配对来进行位点识别,通常数量较多形成家族,且很可能具有多拷贝的特点,以维持一定复杂度,保有指导新位点的可能。同时snoRNA的研究也使人们认识到其多样的基因组织及表达方式,除了独立基因外,还有寄生在内含子中的或成簇表达的等。这些基因组织在表达上有“协同”和/或“经济”的优势,其它ncRNA也很有可能采用。
其他文献
大众创业,万众创新,推动了高校创新创业教育的发展.而对于高水平民办院校来说,人才培养的路径和方式就是创新创业教育.本文在分析国内外创新创业教育方面取得成功经验的基础
“创新”发展理念处于五大发展理念之首,是管国家发展全局的核心理念.将其融入“马克思主义基本原理概论”教学体系,具有如下意义:第一,丰富了“主观能动性与客观规律辩证统
丛枝菌根(Arbuscular Mycorrhizal,AM)真菌是一种古老的球囊菌门真菌,能与70%-90%的陆生植物形成互惠共生体,促进宿主植物对水分和矿质营养的吸收,显著改善植物的营养状况,明
经过历代传承与发展,"扬州家风"已成为地方文化的优秀基因和城市特质,是实现扬州地区高职生文化自信的力量源泉。基于扬州地区高职院校大学生文化自信的现状分析,本研究从精
国际淡水年,2003年已经过去了,但是增加安全的饮用水和改善卫生设备的工作还在继续.这里所讲的“事实和数字”并不包括所有这些工作的背景.它们只集中在“淡水和工业”这个主
本文通过对荣华二采区10
期刊
小球藻(Chlorella vulgaris)是一种球形或椭圆形单细胞淡水藻类,直径3~8微米,无性生殖,是地球上最早的生命之一,出现在20多亿年前,是一种高效的光合植物,以光合自养生长繁殖,分布极广,极其容易获得,其作为一种高蛋白的海洋生物资源,高效益的实用价值还未被开发。近年来关于小球藻多肽防治糖尿病的动物实验研究和临床研究较少,其防治糖尿病的作用机制研究还有待进一步深入。小球藻多肽具有抗氧化
学习力是未来唯一持久的竞争力,学习力是学习者学习的关键能力.为提高开放教育农民大学生学习力,从而增强其服务新农村建设的能力,本文以《园艺基础》课程教学为例谈谈如何通
近年来,随着我国电梯数量持续高速增长,电梯困人、夹人、坠梯等恶性事故被频频曝出。电梯事故对乘客的生命安全造成了巨大威胁,因此电梯安全问题受到越来越多的关注。电梯的
目的:通过制作糖尿病胃轻瘫大鼠模型,并采用RT-PCR法和Western blotting(WB)方法检测干细胞因子(Stem Cell Factor,SCF)在糖尿病胃轻瘫(Diabetic Gastroparesis,DGP)大鼠胃壁