论文部分内容阅读
目的:观察糖化血红蛋白(HbA1C)对血管内皮细胞分泌eNOS、NO、t-PA、PAI-1、sE-选择素及sICAM-1的影响,探讨HbA1C在动脉粥样硬化形成过程中所起的作用。方法:1.培养人脐静脉内皮细胞(ECV304)。2.ECV304细胞分别与含2%新生小牛血清的RPMI 1640培养基(空白组)、血红蛋白组(5.3%血红蛋白)、低浓度HbA1C组(5.3%糖化血红蛋白)及高浓度HbA1C组(9.2%糖化血红蛋白)孵育24h(分作6孔)。3.各组均用化学比色法测定培养液上清eNOS活力;用硝酸还原酶法测定培养液上清NO的含量;用发色底物法测定t-PA、PAI-1的活性;采用双抗体夹心ABC-ELISA法,测定sE-选择素和sICAM-1的浓度值。结果:1.低浓度HbA1C组NO、eNOS表达与血红蛋白组相似,无统计学差异;高浓度HbA1C组NO、eNOS表达明显低于其他各组。2.空白组、血红蛋白组、低浓度HbA1C组三组PAI-1生成量相似,无统计学差异;高浓度HbA1C组PAI-1生成量明显高于其他各组。低浓度HbA1C组t-PA生成量显著高于与其他各组;高浓度HbA1C组t-PA生成量明显低于空白组及血红蛋白组,更低于低浓度HbA1C组。3.血红蛋白组、低浓度糖化血红蛋白组sICAM-1表达高于空白组;高浓度糖化血红蛋白组E-选择素、sICAM-1表达明显高于其他各组。结论:1.HbA1C对脐静脉内皮细胞分泌NO及NOS的影响呈浓度反向依赖性,高浓度HbA1C组NO、NOS表达明显受抑。2. HbA1C对脐静脉内皮细胞生成t-PA、PAI-1的影响均显示出浓度依赖性,但t-PA活性呈浓度反向依赖,PAI-1呈浓度正向依赖。3.HbA1C对脐静脉内皮细胞生成E-选择素、sICAM-1的影响均表现为浓度正向依赖。4.HbA1C随浓度的增加对内皮细胞分泌相关因子eNOS、NO、t-PA、PAI-1、sE-选择素及sICAM-1表达的影响力增加,提示HbA1C参与了动脉粥样硬化的过程,加速了糖尿病血管病变的发展。