论文部分内容阅读
目的：观察乌灵菌粉对急性期缺血再灌注小鼠神经功能、神经元及髓鞘的影响，并初步探讨了乌灵菌粉与神经递质GABA的关系变化。 方法：本研究分为两部分实验。实验一：评估不同剂量乌灵菌粉（Xylaria nigripes，XN）对大脑中动脉闭塞模型MCAO小鼠干预24小时后神经功能评分及梗死面积的影响，及观察大脑组织形态学的变化，了解神经元的损伤情况。实验二：观察不同剂量乌灵菌粉对缺血再灌注小鼠干预24小时后MBP及GABA表达水平的变化。实验一及实验二小鼠均被随机划分为假手术（sham）组，模型（MCAO）组，模型+低剂量乌灵菌粉[MCAO+XN（L）]组，模型+高剂量乌灵菌粉[MCAO+XN(H)]组。sham组只进行假手术，术后只给予生理盐水；MCAO组不注射乌灵菌粉水提液注射液；MCAO+XN(L)组及MCAO+XN(H)组在MCAO缺血1小时后拔出尼龙栓线，立刻分别注射300mg/kg和600mg/kg乌灵菌粉水提物注射液，急性干预24小时。实验一使用5分制的神经功能评分评估各组小鼠的神经功能缺损的情况；然后将一部分小鼠处死，它们的脑梗死面积用TTC染色，然后计算总结；另一部分小鼠用尼氏染色观察神经元的染色情况、尼氏小体的变化、损伤区域细胞的形态学改变等，并统计神经元数量。实验二一部分小鼠制作脑切片后用免疫组织化学染色法观察髓鞘碱性蛋白的平均光密度；将另一部分小鼠制作缺血侧半脑的脑组织匀浆液，随后用Elisa检测法检测各组小鼠GABA的含量，分析各组差异。 结果：MCAO模型小鼠神经功能评分及梗死面积增高，皮层及海马神经元数目下降，皮层MBP及脑组织GABA含量下降；给予乌灵菌粉治疗后情况好转。实验一：与sham组比较，MCAO处理后小鼠神经功能评分增高、梗死面积增大，海马和皮层神经元减少（P<0.01）。MCAO+XN（H）组和MCAO模型组相比，小鼠的神经功能评分明显减少（P<0.05）；与MCAO模型组相比，MCAO+XN（L）组P值大于0.05。与MCAO组比较，MCAO+XN（L）组和MCAO+XN（H）组梗死面积缩小、海马和皮层神经元凋亡减少（P<0.05）。MCAO+XN（L）组与MCAO+XN（H）组比较，它们之间的神经功能的评分没有统计学的区别；梗死面积增加（P<0.05）；海马和皮层神经元凋亡数量增多（P<0.01）。实验二：与sham组相比，MCAO皮层MBP荧光染色强度降低（P<0.01）；缺血侧GABA含量降低（P<0.05）。海马MBP的荧光染色强度各组间无统计学差异。与MCAO组相比，MCAO+XN（H）组皮层MBP荧光染色强度和GABA含量均升高，MCAO+XN（L）组GABA含量有所增强（P<0.05）。MCAO+XN（L）组和MCAO+XN（H）组相比，皮层MBP荧光强度和GABA含量均无统计学差异。 结论：乌灵菌粉能改善MCAO模型小鼠的脑损伤，有保护神经元及髓鞘的作用，这种作用可能与其调节GABA水平的改变有关。