分离技术对黄连解毒汤物理及生物药剂学参数影响的初步研究

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中药复方的分离精制技术是复方现代化研究所面临的共性技术,基于工业化分离手段的精制工艺是复方由简单的汤剂入药发展到现代新型制剂的必由之路,因此本论文以不同精制技术对分离中药复方的合理性为切入点,探索建立基于工业化分离手段的中药复方现代分离精制理论与技术平台。本论文以清热解毒代表方——黄连解毒汤为研究体系,应用大孔吸附树脂、膜分离、水提醇沉、絮凝等技术制备黄连解毒汤不同精制方法的样品,采用体内药物动力学方法,测定各精制样品中主要药效成分黄芩苷体内过程的差异,阐明了黄连解毒汤不同精制技术对复方物质基础产生的影响,从而建立了不同精制技术分离中药复方合理性的评价指标。物理药剂学与生物药剂学是剂型和制剂设计、制备及生物利用度评价的理论基础,为了探讨不同精制技术产生的复方组分在物理药剂学与生物药剂学方面的差异,本论文对各实验样品物理化学性质与有效成分体内吸收的相关性进行了初步的探讨。研究目的:本论文应用具有工业化前景的多种现代分离精制技术,寻找中药复方物质基础研究的新思路、新方法,旨在探索建立具有工业化开发前景的中药复方药效物质分离理论与技术体系。研究内容:1.考察复方水提取及各精制技术的最佳工艺;2.考察黄连解毒汤及其精制产物固含率的变化规律;3.考察黄连解毒汤及其精制产物物理化学性质的变化规律;4.考察黄连解毒汤及其精制产物生物碱转移率的变化规律;5.考察黄连解毒汤及其精制产物栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱转移率的变化规律;6.考察黄连解毒汤及其精制产物对黄芩苷体内过程的影响规律;7.考察黄连解毒汤及其精制产物对血小板聚集功能的影响规律。研究方法:1.以紫外分光光度法测定总黄酮的含量,确定最佳水提及精制工艺。2.参照2005版药典对各精制产物进行固含率的测定;3.对各精制产物进行物理化学性质的测定;4.紫外分光光度法对各精制产物进行生物碱含量的测定;5.以HPLC法测定各精制产物中的栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱含量;6.用所制备的精制产物进行药动学实验,服药后在不同时间点取血,测定血浆中黄芩苷的含量,绘制药-时曲线;7.求算药动学参数;8.按比浊法在STEELIEX血小板聚集凝血因子分析仪上测定5min内的血小板聚集率,记录最大聚集率并计算血小板聚集抑制率。研究结果:1.以HPLC法采用梯度洗脱同时检测盐酸小檗碱、黄芩苷、栀子苷的方法完全可行,方法灵敏度好,选择性高,分离度好;2.以紫外分光光度法测定总黄酮、总生物碱,方法简便、可行,数据准确、合理;3.以HPLC法测定大鼠血浆中黄芩苷的方法完全可行,方法灵敏度好,准确可靠,杂质干扰少;4.从总体上看,黄连解毒汤各精制样品中,AB-8树脂精制样品的各有效成份转移率处于相对较高的水平;5.黄连解毒汤各精制产物中,AB-8树脂精制样品中黄芩苷的曲线下面积大于其它精制样品,说明树脂精制技术中的其它成份对于黄芩苷的吸收具有促进作用;6.黄连解毒汤不同样品黄芩苷的药时曲线均具有双峰现象;7.黄连解毒汤药动学样品的理化性质与黄芩苷的吸收具有一定的相关性;8.黄连解毒汤各精制产物中,AB-8树脂精制样品对ADP诱导离体家兔血小板聚集抑制率最大,说明该样品抗ADP诱导血小板聚集作用最强。
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