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目的：目前认为治疗肝功能衰竭的有效方法是肝器官移植，但由于供肝缺乏和免疫排斥反应，制约了肝移植的应用。骨髓基质干细胞（BMSCs）具有易获得、自我复制能力强、在特定的条件下可向各胚层来源的细胞分化的特点。将BMSCs定向诱导分化成为肝细胞，进行细胞移植，以替代损伤的肝细胞，对肝病治疗有非常重要的临床价值。本实验探索和筛选诱导BMSCs向肝细胞定向分化为的最佳条件、探索Ca2+在BMSCs向肝细胞定向分化过程中的作用、以及体内移植对肝损伤的治疗作用，为临床上应用BMSCs进行细胞移植治疗肝损伤提供实验依据。方法：用全骨髓法从大鼠骨髓中分离BMSCs，纯化和扩增BMSCs。MTT比色法筛选BMSCs的生长曲线，选择最佳生长状态的BMSCs，培养体系中分别加入肝细胞提取液（G，200μg／ml、500μg/ml）、大鼠和人来源的β-神经生长因子—β-NGF from rat（β-NGF-r，20ng/ml、50ng/ml）、β-NGF from human（β-NGF-h 20ng/ml、50ng/ml）和肝细胞生长因子HGF（50μg/ml）诱导BMSCs向肝细胞分化，通过镜下观察分化细胞的形态、RT-PCR法和免疫细胞化学染色法检测肝细胞的特异性标志物白蛋白（ALB）和a-抗胰蛋白酶（AAT）、吲哚靛青绿（ICG）摄取实验鉴定肝样分化细胞。应用流式细胞技术分别检测BMSCs和G诱导分化细胞内游离[Ca2+]i。将BrdU标记后的BMSCs异体移植入慢性肝损伤和对照组的小鼠体内，免疫组织化学法检测BMSCs在肝内的迁移和分化，血清学指标观察BMSCs移植后对慢性肝损伤的治疗作用。结果：（1）全骨髓分离培养法是纯化、培养和扩增BMSCs的简便有效方法；BMSCs标准生长曲线表明体外培养扩增第3-5代的细胞具有较高的增殖活力。（2）添加G（200μg/ml，500μg/ml）、β-NGF from rat（20ng/ml，50ng/ml）、β-NGF from human（20ng/ml，50ng/ml）和HGF（50μg/ml）诱导后，分化细胞逐渐趋短变圆呈圆形和卵圆形，圆形细胞可以摄取ICG，呈现绿色。免疫细胞化学染色显示分化细胞呈AAT阳性表达；各诱导组分化细胞的AAT表达显著性高于对照组（P＜0.05），其中G、β-NGF组AAT表达强于HGF组（P＜0.05），G、β-NGF组间无显著性差异（P＞0.05），两种不同来源的β-NGF诱导效果无差异显著性（P＞0.05）。（3）RT-PCR结果显示四种诱导剂诱导21d后，分化细胞均表达ALB mRNA。（4）G诱导形成的肝样分化细胞中[Ca2+i较对照组细胞显著性升高（P＜0.05），加入尼莫地平可以阻断BMSCs向肝细胞的诱导分化，并影响细胞的增殖活性。（5）BMSCs移植后7d、14d、28d损伤组受体肝脏内均可见BrdU标记的移植细胞，移植细胞大部分呈现由血管逐渐向肝实质内迁移的过程，BMSCs移植后20d、40d的慢性肝损伤小鼠血清学指标与对照组有明显的改善（P＜0.05）。结论：（1）体外培养BMSCs第3-5代的细胞具有较高的活力。（2）G、β-NGF from rat、β-NGF from human和HGF均可诱导BMSCs向肝细胞分化。（3）Ca2+在BMSCs的增殖和向肝细胞定向分化过程中发挥重要作用。（4）静脉移植的BMSCs可迁移至异种动物损伤的肝脏，可以改善受损肝脏的功能。