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三叉明棵为黎科猪毛菜属植物,在朝鲜、蒙古、巴基斯坦、苏联东部及欧洲等国家以及我国的东北、华北、西北均有分布。《全国中草药汇编》中记载,三叉明棵性味淡凉,主治高血压。国内有学者对其药理作用进行了研究,但是对其具体的药用成分尚不明确,本课题主要对其多糖的药理活性进行了研究,同时在此基础上对一些化学成分进行了初步研究与分析。
本课题以三叉明棵全草为对象,对其中的化学成分进行了初步确定;对三叉明棵多糖的降压疗效进行了研究;研究了多糖的提取工艺;考察了大孔树脂在溶液脱色中的应用及双水相萃取技术在多糖分离中的应用;对粗多糖中的一种无机盐进行了鉴定;通过柱层析对其粗多糖进行了分离,并对其进行了物理化学性质的研究。本文的研究成果对三叉明棵的开发利用以及双水相萃取工艺的应用具有一定的学术价值和使用价值,扩大了人们对植物多糖药理作用的认识。
对三叉明棵化学成分的初步判断采用系统预试验进行分析,结果表明:三叉明棵含有氨基酸、蛋白质、糖及其苷类、有机酸、黄酮类、生物碱、甾醇及三萜等化学成分,未发现酚类、鞣质、皂苷、蒽醌、内酯、强心苷、油脂成分。
在研究多糖降压疗效的试验中采用左旋硝基精氨酸甲酯建立高血压大鼠模型,通过高中低三个多糖剂量组进行降压药理作用的考察。结果发现:高剂量组对左旋硝基精氨酸诱导的高血压大鼠具有显著的疗效,中低剂量组作用不显著;并且高剂量组对正常大鼠无作用;毒理实验研究表明,三叉明棵多糖至少属于低毒药物。
为了研究三叉明棵多糖的提取工艺,采用了浸提法,超声法,回流法,30%乙醇浸提等四种方法,经比较知,回流法的提取率最高。并且通过正交分析得出了水浸提时,提取多糖的最佳工艺为:温度100℃,时间2h,料液比1;10。
提取液脱色对粗多糖的颜色有很大影响。为了研究多糖浸提液的脱色工艺,试验中采用了两种大孔树脂:D101,LX-6m进行脱色对比。结果:大孔树脂D101,LX-6m的脱色率分别68.16%、65.75%,大孔树脂D101的脱色效果优于大孔树脂LX-6m。
本次研究还对多糖分离中传统的水提醇沉法和近年来研究较热的双水相萃取法进行对比。结果:双水相萃取和醇沉法所得多糖的收率分别为2.6%,3.9%;多糖含量分别为33.9%,84.8%。在双水相萃取中,当体系参数为乙醇/硫酸铵=12.7%/26.2%,上下相体积比为1:10.6时,分相效果最好。同时,本次试验还对双水相后续阶段除盐的难题进行了研究。双水相后续阶段采用化学法、物理吸附法、透析法等三种方法进行除盐。结果:前两种方法会使多糖严重损失,并且处理效率低,只有透析法具有高效,处理量大的优点,并且在工业生产中易于放大。
将水提醇沉法得到的多糖用乙醇进行回流后,再冷却,重结晶,得到一种无机物,经检测为硝酸钾。
为了进一步研究三叉明颗多糖,将水提醇沉法得到的多糖进行透析,并用纤维素离子交换树脂进一步分离后,得到四种多糖,对其中的两种进行了纯度分析并采用UV,IR等方法对其结构进行了初步研究,结果表明三叉明棵的这两种多糖皆为氨基糖类化合物。