【摘 要】
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目的：本研究以SD大鼠为动物模型，研究大鼠BMSCs体外分离培养、鉴定和增殖，评价不同浓度的LPS对BMSCs增殖能力的影响；并探讨通过增殖的BMSCs对ALI修复的可行性。方法：1.原代BMSCs的
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目的：本研究以SD大鼠为动物模型，研究大鼠BMSCs体外分离培养、鉴定和增殖，评价不同浓度的LPS对BMSCs增殖能力的影响；并探讨通过增殖的BMSCs对ALI修复的可行性。方法：1.原代BMSCs的分离培养、诱导分化鉴定、流式细胞鉴定，并观察不同代的BMSCs的生长状况。给予不同浓度的LPS与BMSCs共培养，利用MTT法判断BMSCs增殖时LPS的最适浓度。2.随机从28只雌性大鼠中取24只，经腹腔注入0.5ml浓度为5mg/kg的LPS建立ALI，造模0.5h后，将其随机分成3组：治疗组A（8只，经尾静脉注入浓度为1×104/ml的BMSCs，体积为0.5ml），治疗组B（8只，经尾静脉注入预先用浓度为0.01μg/mlLPS共培养的BMSCs1×104/ml，体积为0.5ml），损伤组（8只，经尾静脉注入0.5mlPBS），对照组（4只，经尾静脉注入等量的PBS1ml）。24h后检测各组大鼠的血气指标、肺湿干比、病理变化、及支气管肺泡灌洗液中TNF-α和IL-10的变化。结果：1.分离培养的BMSCs呈现长梭形，紧密排列似漩涡状。经诱导液诱导后，能分化成脂肪细胞和成骨细胞。流式鉴定表面抗原CD29和CD90表达阳性，CD45和CD11表达阴性，符合骨髓间充质干细胞特性。MTT法显示第3代和第5代相比第7代的BMSCs增殖较旺盛。浓度为0.01μg/ml的LPS对BMSCs增殖作用最显著。2.成功造模24h后，损伤组明显出现低氧、二氧化碳潴留和酸中毒，肺湿干比值较正常高，病理切片示肺泡间隔断裂增宽，组织疏松，并有炎性细胞侵润。BALF中的TNF-α较对照组明显增高、IL-10较对照组明显降低。治疗组血气分析指标趋向正常，肺湿干比趋向正常，病理切片肺泡结构相对均匀完整，肺泡间隔增宽不明显，炎性细胞侵润明显减少，BALF中的TNF-α较损伤组明显降低、IL-10较损伤组明显增高，而且治疗组B比治疗组A效果佳。结论：1.BMSCs经诱导可分化成脂肪细胞、成骨细胞。2.本实验用浓度为0.01μg/ml的LPS刺激BMSCs后其增殖能力增强。3.本实验经腹腔注入浓度5mg/kg的LPS可建立ALI模型。4.注入增殖的BMSCs后可改善病理学变化，有助于促炎因子TNF-α的降低和抗炎因子IL-10的增高。
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