论文部分内容阅读
目的:板蓝根为我省大宗药材之一,具有清热解毒、消肿利咽的功效,其作为临床常用中药,至今已有数千年的应用历史,但近年来,中药质量逐渐下降,出现了许多问题,其中较为严重的是药材品种退化问题,其原因可能是由于人们在种植药材时,为了追求利益,大量的使用农药及生长剂,破坏了植物自身的生长特性,从而出现品种退化现象,致使中药药效降低。基于上述原因,本研究将收集于不同产地的11份板蓝根种子同时种植于甘肃中医药大学和政县种子种苗基地,对其进行有效成分的含量测定及抗炎、免疫调节作用的研究,为我省板蓝根优良品种的选育提供依据。方法:1.采用水合氯醛法处理板蓝根粉末,观察药材粉末的显微结构;按照2015版《中国药典》通则项下方法测定板蓝根样品中水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇浸出物含量;分别采用苯酚-浓硫酸法和HPLC法测定了板蓝根样品中的多糖含量以及鸟苷、尿苷、表告依春、腺苷、苯甲酸、水杨酸、靛蓝、靛玉红含量。2.利用HPLC及“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”,以表告依春、苯甲酸、水杨酸、靛蓝、靛玉红为对照峰,研究11份甘肃产不同生态型板蓝根氯仿部位指纹图谱。3.以板蓝根中总灰分、醇浸出物及多糖、鸟苷、尿苷、表告依春、腺苷、苯甲酸、水杨酸、靛蓝、靛玉红含量为评价指标,采用灰色关联分析方法、主成分分析方法、聚类分析方法,结合SPSS 19.0数理软件,对甘肃产不同生态型板蓝根药材质量进行评价。4.采用耳廓肿胀法、足肿胀法、复制气囊滑膜炎动物模型来观察甘肃产不同生态型板蓝根对小鼠的抗炎作用;通过注射环磷酰胺,复制小鼠免疫低下模型,观察甘肃产不同生态型板蓝根对小鼠免疫调节的作用。结果:1.显微镜下观察了板蓝根药材粉末的导管、淀粉粒、方晶、石细胞结构。其中淀粉粒以单粒较多,呈球形、椭圆形或半球形,也可见复粒淀粉,复粒淀粉以二复粒和三复粒为主;甘肃产不同生态型板蓝根药材中水分在7.34%~8.75%之间,总灰分在4.02%~5.70%之间,酸不溶性灰分在0.39%~1.07%之间,醇浸出物含量在35.32%~42.66%之间;板蓝根多糖含量在9.43%~17.57%之间;尿苷含量在0.23 mg·g-1~0.36 mg·g-1之间,鸟苷含量在0.04 mg·g-1~0.08 mg·g-1之间,表告依春含量在1.57 mg·g-1~3.15 mg·g-1之间,腺苷含量在0.32 mg·g-1~0.62 mg·g-1之间,苯甲酸含量在3.36μg·g-1~10.07μg·g-1之间,水杨酸含量在5.51μg·g-1~19.62μg·g-1之间,靛蓝含量在0.98μg·g-1~15.43μg·g-1之间,靛玉红含量在1.21μg·g-1~10.58μg·g-1之间。2.将11份甘肃产不同生态型板蓝根药材氯仿部位的指纹图谱通过“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”处理分析,得到各板蓝根样品与对照指纹图谱的相似度在0.600~0.995之间,除BLG2号样的相似度(0.640)外,其余板蓝根样品与对照指纹图谱的相似度均大于0.900,具有较好的相似度。3.应用灰色关联度分析方法、主成分分析方法、聚类分析方法对甘肃产不同板蓝根药材进行质量评价,结果显示,主成分分析方法及聚类分析方法结果类似,虽然各评价方法之间有一定的差异,但三种评价方法均以BLG2号样质量最优。4.甘肃产不同生态型板蓝根可降低小鼠耳廓肿胀度、足肿胀度以及气囊滑膜炎中总蛋白、LTB4及MDA的水平,提高气囊滑膜炎动物血清SOD水平;降低环磷酰胺模型小鼠血清TNF-α水平,提高胸脾指数、红细胞与白细胞计数以及IFN-γ、IL-4水平(P<0.05,0.01);甘肃产不同生态型板蓝根及四倍体板蓝根之间上述作用无明显差异。结论:甘肃产不同生态型板蓝根药材间各成分含量存有差异。虽然四倍体板蓝根的氯仿部位指纹图谱及质量评价结果与二倍体板蓝根具有一定的差别,但在抗炎及免疫调节方面发现四倍体板蓝根与二倍体板蓝根并未有显著性差异,为板蓝根的利用提供依据。