论文部分内容阅读
论文对CTGF在食管鳞状细胞癌发生发展过程中的作用和相关机制进行了探索，并对RACK1在Wnt/β-catenin信号通路中的功能以及相关的分子机制进行了研究。
结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor，CTGF或CCN2)是CCN家族中的一员。它广泛参与了多种细胞生物学事件，如细胞黏附、细胞增殖和血管生成。在本项研究中，我们发现，CTGF在绝大多数食管鳞状细胞癌中(Esophageal Squamous Cell Carcinoma，ESCC)呈现出高表达的状态，并且其表达水平和肿瘤的分级以及转移等临床病理参数密切相关。在ESCC细胞系Eca109中过量表达CTGF能够促进肿瘤细胞生长，并且显著改变Eca109细胞在裸鼠体内的成瘤能力。由RNA干扰(RNAi)所介导的对CTGF的表达下调显著抑制了肿瘤细胞的生长、克隆形成和体内成瘤能力。在接下来的研究中，我们发现在ESCC细胞系Eca109中过表达CTGF引起了β-catenin在细胞质内的积累和入核，激活了β-catenin-Tcf/Lef信号，该通路的靶基因cyclinDl和c-Myc在Eca109/CTGF细胞中明显上调，而CTGF对cyclinD1和c-Myc的上调作用能够被显性负作用的β-catenin(DNβ-catenin)和Tcf4(DN Tcf4)所抑制。在进一步的研究中，我们发现CTGF的启动子区域包含有一个β-catenin-Tcf/Lef结合位点(TBE)，因此CTGF是β-catenin-Tcf/Lef信号通路的靶基因。这些结果表明， CTGF和β-catenin-Tcf/Lef信号形成一个正反馈通路，促进了食管鳞状细胞癌的发生和发展。
Wnt/β-catenin信号通路广泛地参与了胚胎的发育过程，其不正常的活化导致多种疾病的发生发展。细胞质内β-catenin降解复合物的组分是Wnt/β-catenin信号主要的调控因子。在本项研究中，我们发现活化的PKC受体(RACK1)是细胞质内β-catenin降解复合物的新组分，它能与Axin、GSK3β和β-catenin形成复合物。通过与GBP/Frat1竞争性结合GSK3β，RACK1有效地增强了GSK3β和β-catenin的相互作用，进而促进β-catenin通过泛素化途径降解。在细胞和斑马鱼胚胎中进行的功能研究表明，RACK1能够抑制Wnt/β-catenin信号转导。我们还发现，RACK1在胃癌样本中表达下调，并且其表达水平与肿瘤分化程度密切相关。这些结果表明，RACK1作为β-catenin降解复合物的新成员，是Wnt/β-catenin信号的负调控因子。