论文部分内容阅读
目的:通过观察以活血化痰开窍，熄风镇惊安神为立法组成的中药复方抗痫灵对戊四氮(PTZ)致痫大鼠的抗痫作用及对致痫大鼠血清中神经递质、及海马组织相关细胞因子表达的影响，从分子生物学水平探讨癫痫的发病机制及活血化痰开窍，熄风镇惊安神法治疗癫痫的可能作用机制，为临床应用提供理论依据。 方法:Wistar大鼠90只，随机取10只作为空白对照组，其余80只采用戊四氮(PTZ)腹腔注射(iP)法进行造模。将戊四氮所诱导成功的癫痫大鼠随机分成5组，设癫痫模型组、丙戊酸钠治疗组（西药对照组）、抗痫灵低剂量治疗组，抗痫灵中剂量治疗组，抗痫灵高剂量治疗组。 观察大鼠痫性发作行为;监测空白组，模型组及治疗后各组大鼠的脑电图;采用光镜观察大鼠脑组织的病理形态;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中的Glu、GABA含量;免疫组化方法检测大鼠脑组织中海马IL-6、IFN-γ蛋白的表达;采用Western免疫印迹(Western blot)方法检测大鼠海马组织中IL-6、IFN-γ的表达。 结果:1、正常组大鼠皮质及海马脑电图均以α、β波为主，无明显节律性。癫痫模型组大鼠皮质及海马脑电图均观察到阵发性痫性放电，表现为高电位的棘波、尖波。治疗后西药组、中药中剂量组和中药高剂量组均无癫痫波出现，而中药低剂量组3只大鼠有棘波、尖波出现，且海马痫样放电较皮质放电尤为明显，出现频率没有模型组高。 2、病理研究结果表明，西药组和中药复方组能够不同程度减缓癫痫发病过程中海马区神经元的变性和坏死。 3、模型组大鼠血清中Glu含量显著升高，与正常对照组比具有显著性差异(P＜0.01);中药高、中、低剂量组、西药组治疗后，血清中Glu含量均低于模型对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，但均未达到空白组的水平(P＜0.01)。 4、模型组大鼠血清中GABA含量显著降低，与正常对照组比具有显著性差异(P＜0.05);中药高、中、低剂量组及西药组治疗后，血清中GABA含量均明显高于模型对照组，与模型对照组比较均有显著性差异(P＜0.05)。 5、模型组大鼠海马区IL-6蛋白阳性目标面光密度值显著高于空白组(P＜0.01)，各治疗组治疗后除中药低剂量组外，大鼠海马区IL-6蛋白阳性目标面密度值均显著低于模型组(P＜0.05);但未达到空白组水平(P＜0.01)。 6、模型组大鼠海马区IFN-γ蛋白阳性目标面密度值显著高于空白组(P＜0.01)，各治疗组治疗后除中药低剂量组大鼠海马区IFN-γ蛋白阳性目标面密度值均显著低于模型组(P＜0.05)，但均未达到空白组水平(P＜0.01)，中药低剂量组治疗后与模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。 7、模型组大鼠海马中IL-6蛋白光度比显著增加，与空白组比较具有显著性差异(P＜0.01);西药组、中药高、中剂量组大鼠海马中IL-6蛋白光度比，较模型组显著降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，但均未达到空白组的水平(P＜0.01);中药低剂量组光度比与模型组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，各治疗组之间相比差异无统计学意义(P＞0.05)。 8、模型组大鼠海马中IFN-γ蛋白光度比显著增加，与正常对照组比具有显著性差异(P＜0.01);西药组、中药高、中剂量组大鼠海马中IFN-γ蛋白光度比，较模型组显著降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，但均未达到空白组的水平(P＜0.01);中药低剂量组光度比与模型组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，各治疗组之间相比差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论:以活血化痰开窍，熄风镇惊安神为立法组成的中药复方抗痫灵对癫痫有明确的抑痫作用。它能够通过增加血清中Glu的含量、减少GABA含量，进一步证实谷氨酸的上调和GABA的下调是癫痫发生的原因;通过降低大鼠海马的IL-6、IFN-γ蛋白阳性表达，证实细胞因子与癫痫发病有密切关系。综上所述，中药复方抗痫灵能有效控制癫痫发作，对癫痫大鼠具有脑保护作用，是理想的抗痫药物。