艾灸对脾虚胃溃疡大鼠EGFR和ERK1/2的影响

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目的:通过观察艾灸足三里、中脘、脾俞和胃俞(穴)对脾虚胃溃疡大鼠脾虚症状、胃组织HE染色情况、胃黏膜损伤指数以及胃组织EGFR、磷酸化ERK1/2蛋白表达的影响,探讨艾灸对脾虚胃溃疡损伤可能的修复机制。对比艾灸与临床经典方四君子汤对脾虚胃溃疡的作用,为艾灸在临床的应用提供可靠的实验依据。方法:50只健康SD大鼠随机平均分为空白组、模型组、艾灸穴位组、艾灸非穴位组和四君子汤。除空白组外其余各组大鼠均采用大黄苦寒泻下法建立大鼠脾虚模型,在此基础上运用无水乙醇灌胃制备脾虚胃溃疡大鼠模型。以艾灸足三里、中脘、脾俞、胃俞穴为被试因素,以灌服四君子汤为对照,采用脾虚动物模型标准和脾虚症状积分表检测大鼠脾虚症状,按Guth法计算胃黏膜损伤指数,HE染色光镜下观察胃组织形态学变化,免疫组织化学法检测胃黏膜表皮生长因子受体和Western-Blotting检测磷酸化细胞外信号调节激酶蛋白(p-ERK1/2)的表达。结果:1.在脾虚造模过程中,造模大鼠随时间的增加逐渐出现大便便溏,食欲减退,食量和体质量减少,精神倦态和皮毛蓬松等脾虚症状,说明脾虚大鼠造模成功。2.艾灸足三里、中脘、脾俞、胃俞穴可改善脾虚胃溃疡大鼠的脾虚症状,与治疗前和治疗后的模型组、艾灸非穴组相比差异有显著的统计学意义(P<0.01);艾灸组的脾虚症状积分稍低于四君子汤组,差异无统计学意义(P>0.05)。3.艾灸足三里、中脘、脾俞和胃俞穴可改善脾虚胃溃疡大鼠的胃组织形态学,与模型组、艾灸非穴组、四君子汤组相比,艾灸组大鼠表面的胃黏膜较完整,破损改善明显。4.艾灸足三里、中脘、脾俞和胃俞穴可降低脾虚胃溃疡大鼠的胃黏膜损伤指数,与模型组相比差异有显著的统计学意义(P<0.01);艾灸组的胃黏膜损伤指数虽低于艾灸非穴位和四君子汤组,但差异无统计学意义(P>0.05)。5.艾灸足三里、中脘、脾俞和胃俞穴可提高脾虚胃溃疡大鼠胃组织EGFR和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达,与空白组、模型组、艾灸非穴组相比差异有显著的统计学意义((P<0.01);艾灸组胃组织EGFR和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白稍低于四君子汤组,差异无统计学意义(P>0.05)。而且胃粘膜组织中EGFR平均灰度值表达越少,阳性反应产物越高,磷酸化ERK1/2蛋白表达水平越高,两者之间具有显著相关性(r=-0.794,P<0.01)。结论:1.艾灸足三里、中脘、脾俞、胃俞(穴)可明显改善脾虚胃溃疡大鼠的脾虚症状,降低胃黏膜损伤程度以及减轻胃组织形态学发生病理化的程度,提示艾灸有利于脾胃运化功能的恢复和对溃疡损伤的胃黏膜组织具有一定的修复作用。2.艾灸足三里、中脘、脾俞、胃俞(穴)可能通过提高和促进胃黏膜组织EGFR的激活和表达,介导ERK磷酸化并激活EGFR/ERK信号转导途径,从而产生细胞增殖、分化等多种生物学效应,起到减轻胃黏膜损伤、促进胃黏膜增殖修复的作用。3.艾灸足三里、中脘、脾俞、胃俞(穴)在改善脾虚症状和促进胃黏膜的损伤修复方面与四君子汤作用相当,且其疗效优于艾灸非穴组,说明艾灸是治疗脾虚胃溃疡的有效途径,且具有穴位的相对特异性,反映了艾灸—穴位—经络的综合效果。
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