【摘 要】
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外源性凝血途径为人体主要的凝血途径,血浆中TF的表达与动脉粥样硬化、脓毒血症和DIC等许多病理过程密切相关.因此对外源性凝血途径的阻断调节,对这些疾病的预防与治疗有非常
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外源性凝血途径为人体主要的凝血途径,血浆中TF的表达与动脉粥样硬化、脓毒血症和DIC等许多病理过程密切相关.因此对外源性凝血途径的阻断调节,对这些疾病的预防与治疗有非常重要的临床意义.我们在上述工作的基础上研制组织因子突变体,通过与TF竞争结合因子VⅡ/VⅡa而达到抑制外源性凝血途径的目的.X射线晶体衍射和Alanine Scan证实TF与因子VⅡ/VⅡa结合的功能域与协同催化功能域是相对独立的,因此可以设计其突变体,将其协同催化的功能域通过突变而失活,保留其与因子VⅡ/VⅡa结合的功能域.TF突变体可与野生型TF竞争结合因子VⅡ/VⅡa,从而竞争性抑制野生型TF的功能,实现降低或阻断外源性凝血途径的启动,达到防治DIC以及其他以血栓形成为主要病理变化的疾病.根据上述原理设计了两个sTF的突变体（MCsTF和MFsTF）,并通过计算机模拟技术,对突变体结构的合理性进行分析.用PCR的方法,对sTF cDNA基因进行了点突变,序列分析证实后与原核表达载体重组,并实现了在大肠杆菌中高效表达,r-MCsTF和r-MFsTF均达到菌体总蛋白的30﹪以上.
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