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睡眠是一个复杂的生理过程,正常人每天均有一个自然的睡眠觉醒周期,这是中枢神经系统主动产生的神经调节过程。睡眠对于机体的生长发育、学习记忆等方面均具有重要的意义。随着生活节奏的加快,睡眠剥夺现象普遍存在,并且对正常生活产生了巨大的影响。本研究建立大鼠睡眠剥夺24、48、72h模型,运用RT-PCR和免疫组化方法检测不同时间点大鼠脑内海马、皮质、小脑三个部位c-fos、nestin、bid3和jak2基因mRNA水平和蛋白水平的变化。为进一步研究睡眠剥夺所造成生理影响的分子机制提供线索。第一部分:RT-PCR检测c-fos、nestin、bid3和jak2基因mRNA水平变化方法:采用小平台水环境法建立大鼠REM睡眠剥夺24、48、72h模型,设立大平台对照组和正常饲养对照组,RT-PCR方法分别检测各组大鼠海马、皮质和小脑中c-fos、nestin、bid3和jak2的表达水平。结果:与空白对照组(C)比较,可见c-fos、bid3和jak2表达水平随SD时间延长而增加,且与大平台对照组(LP)存在统计学差异。而SD各组可见nestin表达水平降低,但与LP组比较,仅海马可见明显差异,皮质与小脑均无明显差别。第二部分:免疫组化检测Fos、Nestin、Bid3和Jak2蛋白水平变化方法:采用小平台水环境法建立大鼠REM睡眠剥夺24、48、72h模型,设立正常饲养对照组,免疫组化SP法分别检测各组大鼠海马、皮质和小脑中Fos、Nestin、Bid3和Jak2蛋白的表达水平。结果:与空白对照组(C)比较,SD组在海马、皮质、小脑三个部位Fos、Bid3和Jak2蛋白表达水平均有提高,而在这三个部位均未见明显Nestin阳性细胞。本研究结果显示:睡眠剥夺对大鼠中枢神经系统c-fos、nestin、bid3和jak2基因的mRNA和蛋白水平表达均有影响。总体而言,SD可以上调c-fos、bid3和jak2基因mRNA水平,且蛋白水平也有提高。同时,SD可以下调neatin表达水平。但同一基因在大脑不同部位表达水平并不一致,且在同一部位基因的mRNA水平与蛋白水平变化也不一致。可能与大脑不同部位对睡眠剥夺反应不一致相关,也与同一基因在不同中枢神经系统细胞中的功能不同有关。