氧化苦参碱对瘢痕成纤维细胞的作用及瘢痕相关基因的研究

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目的:了解瘢痕相关基因与病理性瘢痕成纤维细胞功能状况的关系,探讨药物对瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞功能状况及瘢痕相关基因的影响,以验证瘢痕相关基因和发现有效的瘢痕治疗药物及其作用机理.方法:以体外单层培养的成纤维细胞为试验对象,通过采用MTT比色法、流式细胞周期分析法、FITC-Annexin V-PI双染法、流式细胞蛋白检测法和RT-PCR等实验方法,分别对瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、正常皮肤的成纤维细胞的细胞周期、增殖、凋亡、信号传导、基质合成及瘢痕相关基因(胸腺素β<,4>、细胞色素C、47#克隆基因)的mRNA表达进行了研究;并观察氧化苦参碱、氢化可的松对细胞功能状况及瘢痕相关基因的影响.结果:氧化苦参碱、氢化可的松能使瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、正常皮肤成纤维细胞的细胞活性降低,凋亡增加,Ⅰ型前胶原、Ⅲ型前胶原、FM的mRNA表达量降低.氧化苦参碱使瘢痕疙瘩的MMP-1 mRNA的表达量升高.瘢痕疙瘩中胸腺素β<,4>mRNA表达量较增生性瘢痕和正常皮肤减少,细胞色素C、47#mRNA的相对表达量在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、正常皮肤成纤维细胞三组间无明显差异,未发现上述基因与细胞功能状况之间有明显联系.结论:氧化苦参碱、氢化可的松通过抑制瘢痕疙瘩、增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,诱导细胞凋亡,减少基质合成、降低层黏连蛋白mRNA表达,而可能具有控制瘢痕形成的作用.氧化苦参碱可能还具有经诱导瘢痕疙瘩MMP-1mRNA的表达以增加细胞外基质降解的作用.胸腺素β<,4>可能参与瘢痕疙瘩的形成机制.
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