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目的:研究CoCl2诱导的早期缺氧对人视网膜色素上皮(retinal pigmentepithelium,RPE)细胞凋亡的影响。
方法:体外培养人RPE细胞,利用氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)建立化学缺氧模型模拟RPE细胞缺氧。实验分为对照组和缺氧组。缺氧组分为缺氧时效组和CoCl2量效组,前者以浓度200μmol/L的CoCl2,分别诱导缺氧1、2、3、6、8、12、24 h;后者以浓度为50、100、150、200、300、400μmol/L的CoCl2诱导缺氧2 h。应用Hoechst染色法测定各组细胞的凋亡率。
结果:与对照组相比,缺氧组RPE细胞凋亡率明显增加。缺氧2 h内细胞凋亡率随缺氧时间的延长而升高,2 h时细胞凋亡水平达峰值,其后随缺氧时间延长细胞凋亡率下降,24 h时细胞凋亡率仍高于对照组;当CoCl2浓度0~400μmol/L范围内时细胞凋亡率随CoCl2浓度的增大而升高,当CoCl2浓度在0~200μmol/L范围内时这种升高趋势更明显。
结论:CoCl2诱导的早期缺氧可促使体外培养RPE细胞凋亡,细胞凋亡与缺氧时间和CoCl2诱导浓度存在相关性。