三种三尖杉属植物抗肿瘤活性成分研究

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本论文由两章组成。第一章中分离并鉴定了三种三尖杉属植物贡山三尖杉(Cephalotaxus lanceolata)、篦子三尖杉(C.oliveri)和高山三尖杉(C.fortunevar alpina)化学成分。第二章对三尖杉二萜进行细胞毒、NF-κB信号通路、抗炎活性筛选评价。  1.化学成分研究  三尖杉属植物化学成分结构类型丰富,包括生物碱,萜类,黄酮和木脂素等。我们运用多种分离技术和鉴定方法,从上述3种植物中共分离鉴定出70个化合物,其中16个新化合物。这些化合物类型涉及生物碱、二萜、倍半萜和木脂素。发现6个新三尖杉降二萜(C19)(20a,21a,24a,27a,2c和4c)和1个该类化合物的中间体(C20)(1c),此前该类化合物只报道了11个。另外,还分离得到2种三尖杉生物碱直接中间体(1a,2a和2b)。  通过有机溶剂提取、萃取,色谱分离等手段,从贡山三尖杉(C.lanceolata)中分离得到30个化合物(包括生物碱,三尖杉二萜,木脂素),其中新化合物有9个。化合物1a和2a为三尖杉生物碱的重要中间体。前人通过化学转化等实验推测三尖杉碱与高绿刺桐碱可能存在统一的生源途径,都是由两分子的苯丙氨酸(或者酪氨酸)缩合,经过一系列氧化、环合而来,可是一直没有发现必要的中间体,而化合物1a和2a的发现,有力证明了两类生物碱来源共同生源途径。  从篦子三尖杉(C.oliveri)中分离鉴定出26个化合物,其中新化合物有4个,包括两个生物碱和两个倍半萜。化合物1b可能为人工产物,是在N原子旁边的C-10位置上为加上了丙酮基。而化合物2b和1a一样,为三尖杉生物合成的关键中间体。目前尚未全部完成成分研究工作。  从高山三尖杉(C.fortune var alpina)非碱部位分离鉴定出14个化合物,都是二萜及倍半萜。其中新化合物有3个,这些新化合物为2个三尖杉环庚三烯酮(C19)以及1个骨架C20三尖杉二萜,推测该类C20二萜为三尖杉环庚三烯酮的重要中间体。  2.生物活性研究  运用MTT法对三尖杉二萜进行细胞毒活性筛选;运用萤光素酶双报告基因检测方法对该类二萜进行了NF-κB信号通路初步探究;还进行了抑制一氧化氮生成活性评价。  三尖杉二萜细胞毒活性筛选结果显示,多数三尖杉二萜显示出较强的细胞毒活性,甚至活性强于阳性对照喜树碱。而当环庚三烯酮结构被部分还原时,细胞毒活性消失(IC50>20μM)。这结果表明,环庚三烯酮部分可能为该类化合物的活性必需基团。NF-κB信号通路初探发现该类化合物对该通路具有显著抑制活性,提示该类化合物抗肿瘤活性机制可能与NF-κB信号通路有关。抑制一氧化氮生成实验结果表明这类三尖杉二萜具有较好的抗炎活性,这与NF-κB信号通路抑制活性一致,提示它们可能还具有免疫抑制的活性。
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