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目的: 1.参考先前课题组相关的实验研究内容，复制以玉米油-白酒-吡唑混合悬浊液灌胃，腹腔注射橄榄油-CCl4溶液并配合饲喂定制高脂饲料，以复制慢性酒精性肝损伤大鼠(ALD)模型。 2.通过检测相关指标，从药效学角度观察造模是否成功，观察清肝活血方及其拆方对ALD大鼠的治疗作用。 3.研究清肝活血方及其拆方对ERS介导肝细胞凋亡PERK/eIF2a信号转导通路调控作用的位点、强度及其对该信号转导与串话过程中的协同或拮抗效应。 4.在上述体内实验的基础上，综合分析清肝活血方Hcy-eIF-2α-Caspase-12信号通路实验数据，探讨清肝活血方治疗大鼠ALD的作用机制，丰富中医ALD病机“湿热淤血”学说，为其治疗提供实验依据。 方法: 1.以白酒-玉米油吡唑混合液灌胃，橄榄油-CCl4混合液腹腔注射的同时饲以高脂饲料的方法进行ALD模型的复制，结合造模进程结束之后的体重、肝体指数、肝脏生化指标、病理学检查，从各方面对造模效果进行评价。 2.通过模型组和清肝活血方及其拆方组大鼠的体重、肝体指数、肝脏生化指标、病理学检查等方面的差异，多方面评价清肝活血方及其拆方对ALD的防治作用。 3.通过检测Hcy浓度以及Hcy-PERK/eIF-2α-Caspase-12信号通路相关分子蛋白的表达，初探清肝活血方及其拆方治疗ALD的作用机制。 结果: 1.从形态学方面观察到，大鼠的生理情况跟造模存在很大关联，与正常大鼠相比，模型大鼠胆小易受惊，轻微响动就可造成其在笼盒中盲目乱窜，一定造模周期以后，酒精耐受性差的大鼠甚至出现腹水现象，甚至危及到生命;与正常组相比，模型组大鼠体重显著降低(P＜0.01)，肝体指数升高(P＜0.01);ALT、TBIL、γ-GT升高(P＜0.05或P＜0.01);血清中TC以及肝脏组织中TG、TC均升高(P＜0.05或P＜0.01);肝脏病理形态学检查中显示:正常大鼠的肝小叶结构清晰，细胞排版整齐，肝窦无异常现象，肝细胞结构清晰，胞质丰富，胞核浑圆;模型组大鼠肝组织出现明显细胞肿胀现象，排版不再规则;肝小叶结构紊乱，其中散在点灶状坏死细胞，中央静脉以及汇管区存在炎症细胞浸润现象，肝窦扩张，可见弥漫空泡变性，胞质内有较大脂肪空泡。中央静脉四周、汇管区均有较为明显胶原纤维增生，向肝小叶内延伸，存在明显的ALD病理表现。 2.和模型组大鼠相比，清肝活血方及其拆方可以较为明显改善大鼠生理状态，减轻酒醉后大鼠半昏迷状态的持续时间;清肝活血方及其拆方能不同程度地显著降低大鼠血清ALT、TBIL(P＜0.05或P＜0.01)，降低TG、TCH(P＜0.05或P＜0.01);恢复部分肝小叶结构，维持肝脏结构，保护肝细胞形态;减轻炎症细胞浸润和肝细胞空泡变性，减轻中央静脉和汇管区向肝小叶内的蛛网状纤维胶原增生。 3.与正常组大鼠相比，模型组大鼠血清内Hcy含量显著升高(P＜0.01)，形成较为严重的高同型半胱氨酸血症(Hhcy);GRP78、GRP94、p-e1F-2α、Caspase-12，9，3的蛋白表达升高，e1F-2α没有变化。而与模型组大鼠相比，清肝活血方降低了Hcy浓度，其中活血组显著降低(P＜0.01)，清肝活血组有下降趋势，但无统计学差异。活血方主要通过有效降低Hcy浓度减少应激源;清肝方主要通过减少分子伴侣GRP78、GRP94的表达，以及凋亡级联反应中caspase-9、caspase-3的表达，减轻ERS的状态和凋亡效应因子，从而抑制肝细胞凋亡;两拆方之间存在改善不同的侧重点，且存在协同调节作用。全方及其拆方都能不同程度下调GRP78、GRP94和Caspase-12，9，3的蛋白表达。实验结果显示，清肝活血方及其拆方可较为显著缓解ALD大鼠的Hhcy，通过调节p-e1F-2α和Caspase-12，9，3特异级联反应，减少肝细胞凋亡，确实对Hcy-PERK/e1F-2α-Caspase-12通路存在调节作用。 结论: 1.课题参考其他造模方法和前期课题组成功建立的模型，用白酒-玉米油吡唑混合液灌胃，橄榄油-CCl4混合液腹腔注射，结合高脂饮食复制的大鼠ALD模型，符合ALD病变过程和诊断标准; 2.清肝活血方及其拆方明显改善ALD大鼠的肝功能、血脂以及肝脏中脂质含量、肝脏病理学形态等方面，这可能与其调节Hcy，从而影响PERK/e1F-2α信号通路介导的ERS，从而影响Caspase-12，9，3特异级联反应，减轻肝细胞凋亡有关。