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目的肝豆状核变性（Hepatolenticular Degeneration, HLD)，亦称Wilson病（Wilson disease,WD），是一种伴随铜代谢障碍的常染色体隐性遗传性疾病，全世界发病率约为1︰30000～100000。临床症状系由铜在体内蓄积所致，主要表现为肝功能异常、神经精神系统功能障碍、角膜色素环及肾功能异常等。WD的致病基因为ATP7B，定位于13q14.3区，截止目前已发现其致病基因突变400余种，突变位点几乎遍布整个基因编码区。对WD的基因突变的深入研究，有助于WD的早期诊断和治疗。本研究运用人类基因组DNA提取、PCR扩增及DNA序列分析等技术对WD的致病基因ATP7B全部21个外显子及邻近内含子区域进行突变扫描，以获得确切的基因突变类型。初步分析WD患者基因型与表型的关系，为WD分子病因学研究提供数据，有助于我省WD患者的基因诊断和遗传咨询。方法采集12例WD患者和50名无血缘关系健康对照者的外周血，采用经典Miller蛋白酶K-氯化钠盐析法从其外周血白细胞中提取基因组DNA，应用聚合酶链反应(PCR)和DNA直接测序技术对12例WD患者进行ATP7B基因突变位点检测，同时应用限制性内切酶酶切分析的方法证实发现的突变。参阅国内外已有研究和报道，应用统计学方法，初步分析WD基因型和表型间的关系。结果1.本研究共检出ATP7B基因突变4个：R778L、A874V、T935M和P992L均为已有报道突变。2. HpaII酶切反应未发现健康对照者存在R778L突变。3.本研究共发现ATP7B基因的SNPs 5个：A406S、L456V、L770L、K832R和2866-13g>c。均已被NCBI的SNP数据库收录。4.本研究所检出的基因变异均为点突变。5.本研究中R778L的突变率为41.7%。6. Arg778Leu突变和Thr935Met突变的患者与无该点突变的患者基因型与临床表型比较P>0.05，临床表现未见明显差异。结论1.本次研究再次证实ATP7B基因第8外显子R778L为高频突变位点，与前人研究一致，说明R778L也是山西省WD患者的热点突变。2.临床上可用HpaII酶切反应作为WD患者初步筛选方法。3. Arg778Leu突变和Thr935Met突变与临床表型在本研究中均未发现有相关性。4.本研究所得结果与前人只研究我国热点突变所得结果基本一致，对WD的基因诊断是否只进行热点突变的检测即可，有待于加大样本量进行确定。