TIMP-2基因转染FDM豚鼠模型早期后部巩膜MMP-2动态表达研究

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目的:通过对形觉剥夺性近视豚鼠模型脉络膜上腔注射外源性TIMP-2基因,观察近视早期后极部巩膜MMP-2的表达,探讨外源性TIMP-2基因对后极部巩膜MMP-2表达的影响。方法:采用单眼形觉遮盖法对3周龄三色豚鼠进行形觉剥夺,2w后通过检影验光和测量眼轴长度证实FDM模型是否建立成功。从模型建立成功的豚鼠中随机选取60只,随机分成4组,分别为TIMP-2组(脉络膜上腔注射外源性TIMP-2基因)、空质粒组(脉络膜上腔注射空质粒)、生理盐水组(脉络膜上腔注射生理盐水)、对照组,每组15只。TIMP-2组、空质粒组、生理盐水组对右眼完成注射操作后继续遮盖,其中TIMP-2组左眼为自身对照组;对照组右眼持续遮盖不作任何处理。分别于注射后2d、7d、14d采集后极部巩膜标本,用RT-PCR及Western Blot法检测MMP-2 mRNA及蛋白的表达,统计学分析各组之间及不同时间表达的差异。结果:(1)注射后TIMP-2组MMP-2 mRNA及蛋白的表达出现先降低后增高的变化,注射后2d与7d MMP-2 mRNA及蛋白表达变化有显著性差异(P<0.05),7d与14d表达差异无统计学意义(P>0.05)。注射后2d、7d、14d,TIMP-2组、自身对照组、对照组之间比较,MMP-2 mRNA及蛋白的表达变化均有统计学意义(均P<0.05);空质粒组、生理盐水组、对照组之间比较,差异无统计学意义(均P<0.05)。(2)注射后TIMP-2组TIMP-2 mRNA表达出现先增加后减少的变化。注射后2d与7d表达变化有统计学意义(P<0.05),7d与14d差异无统计学意义(P>0.05)。注射后2d、7d、14d, TIMP-2组、自身对照组、对照组之间比较,TIMP-2 mRNA表达变化均有统计学意义(均P<0.05);空质粒组、生理盐水组、对照组之间比较,表达变化无统计学意义(均P>0.05)。结论:外源性TIMP-2基因转染能明显抑制形觉剥夺性近视眼后极部巩膜MMP-2 mRNA及蛋白的表达,这种改变早期就已经开始发生,随着转染后时间的延长出现先降低后增高的变化。
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