【摘 要】
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雄性不育性是利用植物杂种优势的主要途径之一,应用核酸酶基因及其抑制蛋白基因在花药、花粉中的特异表达,创造雄性不育性及其恢复性,是继抗虫、抗除草剂之后植物基因工程研
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雄性不育性是利用植物杂种优势的主要途径之一,应用核酸酶基因及其抑制蛋白基因在花药、花粉中的特异表达,创造雄性不育性及其恢复性,是继抗虫、抗除草剂之后植物基因工程研究的又一新领域.该研究克隆了拟南芥菜花药特异启动子、构建了雄性不育基因和恢复基因表达载体,用基因枪介导将雄性不育基因导入玉米.1.以拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)基因组DNA为模板,报据已发表的A9启动子的序列设计5和3引物,通过PCR扩增得到一条约0.35kb的特异扩增片段,克隆到载体pUC18上;2.利用玉米(Zea mays L.)花粉特异启动子Zml3、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyoliquefaciens)的核酸酶基因Barnase,nos3终止序列构建带有Zm13-Rarnase-nos3不育基因的载体pZMS,pBARGUS上的抗除草剂基因35S-Bar-nos 3插入到pZMS上,构建成带有选择标记的雄性不育基因表达载体pZMSBAR.3.以玉米Q31×Z3、Z31×Q31基因型的幼胚为外植体,在N6培养基上诱导产生愈伤组织.从理论上对花粉特异启动子在创造雄性不育性中的应用价值进行了探讨.
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