姜黄的质量控制研究及姜黄色素与茶多酚联用纳米体系的制备、质量控制和体外活性研究

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中药姜黄是传统的中药材,以姜黄素、脱甲氧基姜黄素、双脱甲氧基姜黄素为代表的姜黄素类化合物是其主要的活性成分。JH1是姜黄中一种姜黄素类新天然产物,抗炎活性强。本研究采用LC-MS/MS技术对姜黄药材中姜黄素类化合物进行含量测定,完善了姜黄药材的质量控制体系。本研究建立的LC-MS分析方法精密度、重现性良好,准确度高,稳定可行。聚类分析结果显示四川、重庆产地的姜黄药材中JH1含量明显高于其它产地。鉴于姜黄素类化合物诸多显著的生物活性,将其开发为新型抗肿瘤药物系统具有极强的潜力,但其水溶性和生物利用度阻碍了临床的应用和新药开发。茶多酚和姜黄色素两者均是源自植物提取物的天然酚类成份,在化学结构上具有相似性,且都有极强的抗氧化作用,具有显著的抑制肿瘤细胞增殖的作用。本研究采用薄膜-超声法将姜黄色素和茶多酚同时包埋于固体脂质纳米粒中,制备成抗癌复方纳米粒,采用HPLC-DAD-ESI/MSn技术,从成分定性分析和定量分析两方面首次建立了CTP-SLNs的质量控制方法,建立了复方制剂的完整质量控制体系;并对其体外抗肿瘤活性进行了初步研究。LC/MS质谱裂解研究表明,姜黄素类和茶多酚类8个活性单体在制剂中稳定存在,制剂性质稳定;HPLC指纹图谱分析显示所制得的20批次复方纳米制剂中有17批的相似度大于99%,所有批次复方纳米制剂的成分基本稳定;采用HPLC-DAD法建立了纳米粒中姜黄色素和茶多酚类共8个活性成分的同步含量测定方法,该方法具有良好的精密度和准确度,重现性良好。制剂各项表征指标正常,在六个月存储期间制剂性质稳定,直径波动很小,没有任何退化或聚合。MTT实验结果显示姜黄色素和茶多酚联用对HepG2和CT-26肿瘤细胞的增殖产生了协同抑制效应;联用固体脂质纳米粒对细胞的毒作用较姜黄素、EGCG、姜黄色素、茶多酚以及姜黄色素与茶多酚混合物更强(P<0.05),体现了固体脂质纳米粒给药载体的优越性,提高了姜黄色素和茶多酚的生物利用度,从而提高了对癌细胞的杀伤力,增加药效。
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