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目的：重症急性胰腺炎是临床常见的急腹症，除有胰腺局部的病理损伤表现外，多有明显的全身炎症反应及并发多器官损伤。肠粘膜屏障功能受损后引发的肠道细菌易位是其继发感染和脓毒症的主要原因。肠上皮细胞之间的紧密连接对维持肠粘膜屏障功能起到至关重要的作用，有多种蛋白参与肠上皮细胞间紧密连接的形成，occludin蛋白是其中主要成分。Occludin蛋白的表达、定位和功能状态对肠粘膜屏障功能的维护起到非常重要的作用。对于occludin蛋白表达和功能的调控是该领域研究的关键和难点。TLR4/NF-κB信号传导通路作为关键始发步骤和启动因子参与了多种疾病的发生过程，对机体内免疫应答及炎症反应起到重要的调节作用。
本实验通过建立小鼠重症急性胰腺炎模型，分别应用TLR4、NF-κB的特异性阻断剂，观察肠屏障功能的影响，并检测回肠组织TLR4、NF-κB、occludin蛋白的表达，探讨TLR4/NF-κB信号通路是否通过影响occludin蛋白的表达从而实现对急性重症胰腺炎小鼠肠粘膜屏障的调控。
材料和方法：1、动物与分组：雄性BALB/c小鼠48只，随机共分为4组：对照组、模型组、NF-κB干预组、TLR4干预组。2、模型制备：对照组：腹腔内注射分7次共注射1.5ml生理盐水，与其它组注射液体量相等：模型组(SAP)：腹腔内注射雨蛙肽，剂量为50μg/kg，每小时1次，共7次，于雨蛙肽最后一次注射时同时腹腔内注射LPS，剂量为5 mg/kg；PDTC干预组(SAP+PDTC)：LPS注射同时腹腔注射PDTC，剂量为100mg/kg，TLR4干预组：LPS注射同时腹腔注射TLR4-MD2单抗，剂量为20μg。3、实验方法及检测指标：18 h后处死动物，分别比较各组的腹腔内大体改变、肠粘膜病理改变，血清淀粉酶水平，血清细胞因子水平变化，肠道通透性的变化，RT-PCR法检测回肠TLR4、NF-κB、occludin mRNA表达，免疫组化法检测肠上皮occludin蛋白表达。
结果：重症急性胰腺炎造成了小鼠腹腔内明显炎症反应，肠管水肿，肠粘膜水肿，肠道通透性显著增高，在分别使用PDTC和TLR4-MD2单克隆抗体后，可观察到肠道损伤的降低，肠粘膜水肿改善，血清淀粉酶降低，血清细胞因子下降，回肠TLR4、NF-κB mRNA表达下调，肠上皮occludin蛋白的表达上调，肠道通透性显著降低。
结论：1、急性重症胰腺炎造成了小鼠的血清淀粉酶增高，肠道通透性的增加，血清细胞因子的增高，回肠TLR4、NF-κB mRNA表达上升，肠上皮occludin蛋白表达的下降；2、NF-κB特异性阻断剂PDTC及TLR4-MD2单克隆抗体能降低急性重症胰腺炎所致的肠道通透性的增加，血清细胞因子水平下降，occludin蛋白表达上升，3、NF-κB特异性阻断剂PDTC、TLR4-MD2单克隆抗体能够通过选择性的抑制NF-κB、TLR4活性，上调肠上皮细胞occludin蛋白的表达，从而改善受损的肠屏障功能。4、TLR4/NF-κB信号传导途径信号通路在SAP时肠道屏障功能损伤过程中起重要调控作用，这一作用是通过通过对肠上皮细胞紧密连接occludin蛋白表达和功能的调节上而实现的。而通过对TLR4和NF-κB的抑制，能对损伤后肠粘膜屏障功能产生保护作用。