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目的:以云南省西部地区部分县(市)为本次调查的空间范围,宿主动物(家畜、小型兽类)与传播媒介蜱、关节炎患者为研究对象,采用分子流行病学、血清学的方法,调查了解该地区宿主动物和传播媒介蜱、特定人群感染伯氏疏螺旋体的状况及基因多态性,为莱姆病的防控工作提供科学依据。方法:1.家畜采集静脉抗凝血血样,小型兽类采用夹夜法、鼠笼法捕获后,解剖采集肝肾脾脏样本;布旗法采集游离蜱,体表搜集法采集动物体表寄生蜱;人群选择已排除风湿、类风湿等明确疾病的关节炎患者血液,分离血清。2.家畜血样、小型兽类脏器、蜱虫样本,采用血液/组织基因组DNA提取试剂盒进行DNA提取后,扩增伯氏疏螺旋体5S~23S rRNA间隔区基因、Fla基因、16SrRNA基因。对所得序列进行同源性分析并构建系统进化发育树进行遗传进化分析。3.人群血清应用伯氏疏螺旋体血清IgG抗体检测试剂盒(ELISA)作抗体检测。4.所得结果采用SPSS17.0软件进行统计分析,采用χ~2检验比较差异。结果:1.样本采集情况:共在16个县(市)采集5种家畜动物(牛、羊、犬、马和驴)血液1927份;在23个县(市)采集分属5目10科29属57种的小型兽类肝肾脾脏样本3659份;在9个县(市)采集4属10种传播媒介蜱样本737份;在4个县(市)采集关节炎患者血清281份。2.家畜检测结果:共检测1927份家畜动物血液样本(牛血554份,羊血636份,马血33份,驴血17份,犬血687份),检出伯氏疏螺旋体阳性样本共52份,阳性率为2.70%,分属3个基因型:B.afzelii、B.burgdorferi、B.garinii,以B.afzelii为主(90.38%)。牛、羊、犬、马均有检出,犬血的阳性率最高(6.26%),驴血未检出阳性。16个县(市)中有8个县(市)检出阳性,阳性率最高的依次为德钦(10.33%),兰坪(3.33%),耿马(2.94%)3.小型兽类检测结果:检测3659份小型兽类脏器样本,分属5目10科29属57种,共在30种小兽中检出阳性146份,阳性率为3.99%,分属5种基因型:B.afzelii,B.burgdorferi sensu stricto,B.garinii,B.japonica和B.valaisiana,以B.afzelii为主(56.84%)。23个县(市)中有14个县(市)检出阳性,主要分布于滇西北地区,2500m以上海拔的林区小兽感染率最高。4.蜱虫检测结果:检测4属10种、737只蜱虫样本,共有103份检出阳性,阳性率为13.98%。共从5种蜱(尼泊尔血蜱、卵形硬蜱、粒形硬蜱、微小扇头蜱和柯洛宁血蜱)中检出6个基因型伯氏疏螺旋体(B.afzelii、B.garinii、B.japonica、B.valaisiana、B.burgdorferi sensu stricto、B.sinica),以B.garinii为主(47.57%)。9个县市中6个县(市)采集的蜱检出阳性。主要分布于云南西部地区。5.人群检测结果:共检测4个县(市)281份关节炎患者血清,莱姆病IgG抗体阳性111例,总阳性率为39.50%。结论:1.云南省西部地区家畜、小型兽类宿主动物和媒介蜱存在伯氏疏螺旋体感染。阳性率分别为家畜动物2.70%,小型兽类3.99%,蜱虫13.98%。地区分布集中在滇西北地区。2.云南省西部地区伯氏疏螺旋体宿主动物和媒介种类复杂多样。家畜中牛、羊、犬、马均有检出,其中牛、羊、马感染为云南首次报道;小型兽类共有30种检出阳性,其中20种未见报道;以及5个蜱种(2种硬蜱、2种血蜱和1种扇头蜱)中检出阳性。3.调查区域宿主和媒介感染伯氏疏螺旋体基因型具有较高的多样性。共检出8种基因型伯氏疏螺旋体,宿主动物中检测到5种,媒介蜱中检测到6种,其中2种为尚未确定的基因型。中华姬鼠、白腹鼠、粒型硬蜱检出B.japonica,柯洛宁血蜱(新蜱种)中检出阳性为首次报道,卵形硬蜱检出B.sinica为云南省首次报道。4.云南西部某些地区可能为莱姆病的疫源地。宿主和媒介中检出的伯氏疏螺旋体以B.afzelii、B.garinii和B.burgdorferi sensu stricto为主,占全部阳性的85.04%(256/301)。这三种基因型均为公认的对人有致病性的病原体。检出的基因序列与GenBank中注册的从患者中检出的序列同源性达98~99%。同一地区(德钦县)从家畜、小型兽类和蜱中检测到的B.afzelii,序列同源性达98~99%,表明该地区存在宿主、媒介间病原体的传播链。同时,人群存在莱姆病血清抗体阳性,IgG抗体总阳性率为39.50%。本研究采用分子流行病学调查的方法,证实云南西部地区伯氏疏螺旋体的宿主动物和传播媒介蜱种类多、分布广,病原体基因多样性较高、致病力强;血清学证实特定人群存在感染。由于本课题时间有限,人群感染情况、病原体的分离、患者的确诊等工作仍在进行中,本课题所得结果在NCBI注册序列号有58个,为今后云南省莱姆病的研究和防治提供了科学依据。