【摘 要】
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稻瘟病是水稻最重要的病害之一,能够引起大幅度的减产,其危害范围广又难防治。研究水稻抗稻瘟病的分子机理,可以为通过转基因技术培育抗病品种奠定基础。我们之前的研究发现,
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稻瘟病是水稻最重要的病害之一,能够引起大幅度的减产,其危害范围广又难防治。研究水稻抗稻瘟病的分子机理,可以为通过转基因技术培育抗病品种奠定基础。我们之前的研究发现,富含甘氨酸蛋白基因(Glycinerichprotein Grp)是一个稻瘟病诱导表达的基因。本论文通过基因过量表达和沉默的方法,进一步研究了该基因在水稻抗病反应中的功能。首先构建了 OsGRP1基因的过量表达载体,通过农杆菌介导转化的方法将其转化到水稻日本晴(Nipponbare)中,最终获得了 10株转基因水稻。通过PCR和定量PCR方法验证,发现其中有9株是目的基因的阳性转化植株。抗病性鉴定发现,OsGRP1基因的过量表达增加了水稻对稻瘟病的抗病性,说明OsGRP1参与水稻的抗病反应。进一步的分析发现,OsGRP1基因的表达受稻瘟病菌接种,以及SA和JA处理的诱导。同时,与野生型水稻相比,过量表达OsGRP1基因的转基因植株中,与SA和JA途径有关的抗病防御基因PAL、PR1、PBZ1和LOX的表达量明显增加,说明OsGRP1可能通过调控SA和JA途径来参与水稻的抗病反应。为了进一步验证这个结论,本论文还构建了 OsGRP1的RNAi载体,并导入农杆菌中,为后续转化水稻获得OsGRP1-RNAi的转基因后代奠定了基础。
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