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玉米小斑病是极具破坏性世界重要病害之一,目前,该病害已经对玉米、高粱、大麦和小麦等作物的产量造成了不同程度的降低。病原菌是玉蜀黍平脐蠕孢菌(Bipolaris maydis,有性态:异旋孢腔菌 Cochliobolus heterostrophus)。玉米小斑病防治主要以化学防治为主,但由于生产中常用杀菌剂种类并不多样且施用次数过多,所以很容易产生玉米小斑病对这些杀菌剂的抗性,从而防效下降,造成严重损失。20世纪90年代,苯基吡咯类杀菌剂咯菌腈问世,并且被认为是一种广谱杀菌剂,对果蔬灰霉病防效优异。在我国,咯菌腈主要采用种子处理、土壤处理和喷雾方式,进行病害防控。近年来,发现我国田间灰葡萄孢菌对咯菌腈产生了抗药性,其分子机制为菌体Ⅲ型组氨酸激酶HAMP重复结构域和HATPase_c内发生突变。在我国,防治玉米小斑病的杀菌剂匮乏。本文旨在研究玉米小斑病病菌对咯菌腈抗药性风险评估,为该病科学防控奠定理论基础。具体研究结果如下:(1)建立了玉米小斑病对咯菌腈的敏感性基线。100株玉米小斑病菌株对咯菌腈的平均 EC50 值为 0.044 ± 0.022 μg mL-1,EC50 变化范围 0.013～0.16 μg mL-1;敏感性频率分布呈单峰曲线。(2)评估结果表明,玉米小斑病菌对咯菌腈存在中等抗药性风险。获得了 5株咯菌腈驯化抗药性突变体,经10次转接,其抗药性性状稳定,抗性倍数(RF)均大于100;与野生菌株相比,咯菌腈抗性突变体的产孢能力、致病力均显著下降,但菌丝生长速率上升,而且对不同胁迫因子敏感性表现不同特点:(ⅰ)咯菌腈抗性突变体对渗透压胁迫敏感性明显高于其敏感菌株;(ⅱ)咯菌腈抗性突变体对细胞壁胁迫更敏感;(ⅲ)咯菌腈抗性突变体对细胞膜胁迫表现出不同敏感程度;5株咯菌精抗药性突变体对二甲酰亚胺类杀菌剂存在正交互抗性,与啶酰菌胺和氟啶胺不存在交互抗性;经1.0 MNaCl处理,咯菌腈抗性突变体胞内甘油含量远高于都其亲本敏感菌株;在所获得的5株抗药性突变体中,仅2株在菌体Ⅲ型组氨酸激酶Bmos1检测到突变,即(i)抗性突变体R27-5的Bmos1发生了点突变(Z1125K),(ii)抗性突变体R104在Bmos1密码子1125～1236之间有34-bp的片段缺失,不仅导致11个氨基酸(DNAVNQKLAVR)的缺失,而且导致移码突变和提前终止编码;其他3个咯菌腈抗性突变体(R27-1,R27-2和R32)Bmos1 没有突变,因此,推测玉米小斑病菌对咯菌腈抗药性可能存在其他分子机制。