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目的:2007年,首次报道了非小细胞肺癌中存在EML4-ALK融合突变,并认为是非小细胞肺癌的一种致癌机制。随即问世的克唑替尼用于治疗ALK融合突变非小细胞肺癌获得了显著的临床疗效,因此检测和发现非小细胞肺癌中是否存在ALK的基因改变收到医患双方的共同重视。基于实时定量RT-PCR检测结果,比较ALK D5F3、Ventana D5F3、p-ALK Y1604和EML4不同免疫组化方法检测非小细胞肺癌ALK融合突变的效果,并对相应抗体和方法进行评价,为临床实际应用提供一定参考。 方法:取114例非小细胞肺癌样本进行实时定量RT-PCR分析ALK融合突变状态,其中32例进行ALK D5F3、Ventana D5F3、p-ALK Y1604和EML4四种免疫组化分析和63例进行ALK D5F3、p-ALK Y1604和EML4三种免疫组化分析以检测非小细胞肺癌中是否存在ALK融合突变。 结果:实时定量RT-PCR检测114例非小细胞肺癌发现17例非小细胞肺癌存在ALK融合突变,发生率为14.9%。ALK融合突变非小细胞肺癌倾向于年轻化,与性别和组织学类型没有统计学差异。Ventana D5F3免疫组化分析32例非小细胞肺癌中有5例阳性和27例阴性,其中5例阳性病例有4例实时定量RT-PCR检测为ALK融合突变,而27例阴性病例有2例实时定量RT-PCR检测为ALK融合突变。95例ALK D5F3免疫组化分析有11例阳性和84例阴性,其中11例阳性病例有9例实时定量RT-PCR检测为ALK融合突变,而84例阴性病例有5例实时定量RT-PCR检测ALK融合突变。95例p-ALK Y1604免疫组化分析有18例阳性和77例阴性,其中18例阳性病例有12例实时定量RT-PCR检测为ALK融合突变,77例阴性病例有2例实时定量RT-PCR检测为ALK融合突变。95例EML4免疫组化分析有12例阳性和83例阴性,其中12例阳性病例有10例实时定量RT-PCR检测为ALK融合突变,83例阴性病例有4例实时定量RT-PCR检测ALK融合突变。 结论:我们所研究的样本中非小细胞肺癌ALK融合突变发生率为14.9%,更倾向于年轻化。根据RT-PCR检测结果,Ventana D5F3、ALK D5F3、p-ALK Y1604和EML4对非小细胞肺癌ALK融合检测没有明显优势。p-ALK Y1604比ALK D5F3和EML4抗体效果更好。Ventana D5F3更容易进行阳性结果判定,但不具有优越性。总之,p-ALK Y1604和EML4免疫组化分析可能作为筛查ALK融合突变非小细胞肺癌的方法。